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Wnt信号通路阻滞剂DKK-1通过GCM-1/HtrA4影响滋养细胞侵袭力的研究
目的 探讨Wnt信号通路阻滞剂DKK-1对滋养细胞转录因子GCM-1及HtrA4表达及侵袭力的影响.方法 对绒毛膜滋养层细胞系JEG-3细胞施加外源性重组DKK-1,然后分为对照组和DKK-1组(150 ng/ml).采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹技术及Transwell实验分别检测β-链蛋白、GCM-l、HtrA4 mRNA和蛋白的表达情况及细胞侵袭力的变化.结果 外源性重组DKK-1干预24 h后,与对照组比较,DKK-1组β-链蛋白、GCM-1和HtrA4 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05),Transwell实验显示DKK-1组JEG-3细胞的侵袭力明显下降(P＜0.05).结论 Wnt信号通路阻滞剂DKK-1能够减少GCM-1和HtrA4在滋养层细胞中的表达,进而降低滋养细胞的侵袭力.
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骨桥蛋白在缺氧对滋养细胞侵袭力影响机制中的作用
目的 研究不同氧浓度下滋养细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达与相应氧浓度下滋养细胞侵袭力的相关性,探讨OPN在缺氧对滋养细胞侵袭力影响机制中的作用.方法 利用气体混配缺氧装置(QT-MTX-3),模拟子痫前期胎盘缺氧的低氧环境,培养人胎盘绒毛膜癌滋养细胞系BeWo细胞.采用Western 印迹和实时荧光定量PCR方法,检测不同氧浓度对BeWo细胞OPN表达的影响.采用Transwell侵袭模型,探讨缺氧对BeWo细胞侵袭力的影响.结果 Western blot检测结果显示,缺氧48 h后,低氧组OPN蛋白的表达水平均明显下降,且2%O2组OPN蛋白下降更显著.实时荧光定量PCR检测结果表明,缺氧对滋养细胞OPN mRNA的表达影响呈现出浓度时间依赖性,随着氧浓度的降低和缺氧时间的延长,OPN mRNA的表达呈显著下降趋势.Transwell侵袭实验结果显示,与常氧对照组相比,低氧组细胞侵袭力明显降低,8%O2组和2%O2组的细胞浸润指数分别为0.298 8和0.091 7(P＜0.01).采用Spearman相关分析法,比较OPN表达水平与BeWo细胞侵袭力的相关性,结果显示,随着OPN表达的降低,滋养细胞的侵袭力进一步下降,OPN表达水平与侵袭指数成正相关(rs=0.944,P＜0.01).结论 缺氧降低滋养细胞OPN的表达,表现为浓度和时间依赖性;随着OPN表达的降低,滋养细胞的侵袭力下降.OPN低表达可能是子痫前期滋养细胞侵袭力下降的分子机制之一.
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滋养细胞侵袭力分子调节机制的研究进展
妊娠期,绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblasts,EVT)的侵袭力对于胎盘的形成十分重要.它除受到自身和周围局部环境分泌物质的精细调节外,还受到多种信号通路以及转录调节因子的调控.任何因素导致这些调节的失控,均会导致EVT生物学行为改变,进而导致妊娠相关性疾病,如子痫前期和胎儿生长受限.本文对近年来有关滋养细胞侵袭力分子调节机制的研究成果作一综述.对调节滋养细胞侵袭力分子机制的探索有利于了解滋养细胞在子痫前期以及其他伴有螺旋动脉重铸障碍的妊娠相关性疾病中所扮演的角色,为该类疾病发病机制和治疗方法的深入研究提供新的思路.
