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膜型TNF-α文献资料
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膜稳定型TNF突变体的构建、表达及活性研究
目的:TNF-α可以分泌型(S-TNF)及其前体膜型(M-TNF)两种活性形式同时存在于体内.为膜型TNF的转基因应用,构建一种可表达于胞膜而不被酶解的膜稳定型TNF重组体(mTNFm).方法:在克隆M-TNFcDNA的基础上,删除两型TNF转换酶酶解部位的编码序列,构建出mTNFm并测序验证;建立只表达膜型TNF的真核细胞株.结果:Western blot分析及活性测定结果表明,mTNFm不再发生酶切转换且只通过效-靶细胞间直接接触发挥胞毒效应.通过基因直接注射方式,使mTNFm稳定表达于小鼠体内.结论:所构建的mTNFm及其表达细胞株可用于膜型TNF生物学效应的研究及基因治疗.
