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  • hIL-2/mGM-CSF融合蛋白的构建及表达

    作者:夏荣;林来兴妹;周宏伟;周明乾;陈泽洪;胡志明;王小宁

    目的:构建hIL-2/mGM-CSF原核表达载体,获得具有hIL-2和mGM-CSF活性的hIL-2/mGM-CSF融合蛋白.方法:利用PCR重叠延伸术,将人白细胞介素-2(hIL-2)和鼠粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)基因,通过2个脯氨酸(Pro)基因的中间接头连接起来,扩增出hIL-2/mGM-CSF融合基因,并克隆于表达载体pBV220和pLY4中.结果:获得序列正确的hIL-2/mGM-CSF融合基因,并在大肠杆菌中成功表达,表达率在20%左右.活性测定其hIL-2活性为4.5×105 U/mg,mGM-CSF活性为3.85×106 U/mg.结论:获得了具有hIL-2和mGM-CSF活性的hIL-2/mGM-CSF融合蛋白,为研究hIL-2/mGM-CSF融合蛋白的新生物学功能奠定基础.

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