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钙转运蛋白基因siRNA表达载体的构建及鉴定
目的:构建针对钙转运蛋白(CaT1)特异性干扰RNA(siRNA)及其表达载体,并检测其对CaT1基因的干扰作用.方法:设计CaT1靶向的发夹状siRNA,合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSilencer3.1-H1载体,转化扩增后进行序列测定.用脂质体转染法转染人类胃癌细胞BGC,通过RT-PCR检测CaT1基因表达水平的变化.结果:酶切鉴定与DNA测序分析证明CaT1基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CaT1基因的表达水平明显降低.结论:成功地构建了针对CaT1基因的siRNA载体,转染细胞后可抑制CaT1基因表达.
关键词： siRNA RNA干扰 钙转运蛋白 人胃癌细胞株BGC-823 -
蜂毒素对胃癌细胞株BGC-823生物行为学的影响
目的 观察蜂毒素体外对人胃癌细胞BGC-823增殖、黏附、侵袭的影响,评价其抑瘤的效果.方法 采用MTT法、细胞黏附人工重组基底膜培养小室(Transwell小室)法,观察蜂毒素体外对人胃癌细胞BGC-823增殖、黏附和侵袭能力的影响.结果 与对照组比较,蜂毒素有抑制人胃癌细胞BGC-823增殖的作用(P＜0.01),随着药物浓度的增大以及作用时间的延长,其对细胞的抑制率也明显增大,呈现时间及浓度的依赖性.蜂毒素作用人胃癌细胞BGC-823后,细胞的黏附能力明显降低(P＜0.01),侵袭的细胞数较对照组明显减少(P＜0.01).结论 蜂毒素对人胃癌细胞BGC-823的增殖具有抑制作用；且能抑制人胃癌细胞BGC-823的粘附能力和侵袭能力.
关键词： 蜂毒素 人胃癌细胞株BGC-823 细胞增殖 细胞粘附 细胞侵袭 -
蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823凋亡及其细胞周期的影响
目的:观察蜂毒素体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法:采用MTT法观察不同浓度的蜂毒素(32,16,8,4,2 μg/mL)体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响,并用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡和周期阻滞效应.结果:①与对照组比较,蜂毒素有抑制人胃癌细胞株BGC-823增殖的作用(P ＜0.01),随着药物浓度的增大,其对细胞的抑制率也明显增大,呈现剂量依赖性.②蜂毒素浓度从4 μg/mL开始,即可诱导细胞产生凋亡,随着剂量的增加诱导凋亡的效果更加明显.③在细胞周期方面,与阴性对照比较,蜂毒素作用24小时后S期细胞比例上升,而G0/G1期比例明显下降,蜂毒素浓度达到16 μg/mL时G0/G1期前出现明显的亚二倍体区.结论:蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823的增殖具有抑制作用,且能够引起该细胞的凋亡及改变其细胞周期.
关键词： 蜂毒素 人胃癌细胞株BGC-823 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
