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H9与HepG-2体外共培养上清对HepG-2增殖迁移及凋亡的影响
目的:研究胚胎干细胞H9与肝癌细胞株HepG-2共培养上清对肝癌细胞HepG-2增殖、迁移及凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:体外共培养H9与HepG-2,于不同时间即12、24、36、48 h取得上清,并把不同浓度上清即20%、40%、60%、80%作用于HepG-2细胞,于倒置荧光显微镜下观察细胞的生长情况和形态变化;用MTS法检测不同浓度上清分别作用HepG-2细胞24、48 h后细胞的增殖情况;应用流式细胞术检测细胞的凋亡情况;用Hochest33258染色检测细胞的凋亡情况;Transwell小室法检测上清对细胞侵袭迁移的影响。结果:不同浓度的共培养上清液均对HepG-2细胞的增殖有一定的抑制作用,并且40%浓度及以上的浓度能明显促进肝癌细胞的凋亡,主要是早期和晚期凋亡,小室法也看出,上清对肝癌细胞的侵袭和迁移也具有明显的抑制作用,同时,上清对正常的肝细胞L02无明显的作用。结论:胚胎干细胞与肝癌细胞HepG-2共培养上清能够在体外明显抑制肝癌细胞HepG-2的增殖、迁移和侵袭,并且促进其凋亡,并且具有浓度依赖性,共培养时间越长,抑制效果越好。说明此上清具有一定的抗肿瘤效应。
关键词: 共培养上清 肝癌细胞HepG-2 胚胎干细胞H9 细胞增殖 细胞凋亡 -
MSCs-肝细胞共培养上清对体外培养L02细胞的影响
目的 以体外培养L02细胞为实验对象,了解骨髓间充质干细胞(MSCs)与肝细胞共培养上清的生物活性.方法 采用两步酶分离法、全骨髓贴壁筛选法分别分离肝细胞、MSCs,按比例直接共培养,收集不同时段的共培养上清,用于人肝细胞系-L02细胞的培养.分别以单独培养的肝细胞上清、MSCs上清为对照,观察共培养上清对L02细胞活力和总蛋白合成的影响;同时观察其对L02细胞损伤模型的AST、LDH及细胞凋亡的影响.结果 肝细胞上清、MSCs上清以及共培养上清对L02细胞的活力和增殖均有显著促进作用,表现为L02增殖活跃,总蛋白合成量增加;加入上述细胞上清的酒精损伤L02细胞AST、LDH释放和细胞凋亡显著低于未加细胞上清的对照组,其中共培养上清效果为显著(P<0.05).结论 共培养上清对L02有明显的刺激增殖和损伤保护作用.