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番茄红素对人肝L02细胞氧化损伤的保护作用及其机制
目的 探索番茄红素(Lyc)对过氧化氢(H2O2)诱导的人肝L02细胞氧化损伤的保护作用及其机制.方法 以H2O2诱导的L02细胞氧化损伤为模型,通过测定不同浓度番茄红素预处理后L02细胞的生存率以确定佳处理浓度;通过测定细胞活性氧(ROS)水平、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、细胞内丙二醛(MDA)水平,培养液上清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)活性等指标观察番茄红素对细胞氧化损伤的保护作用;通过检测细胞核蛋白中的核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达量及其靶基因血红素加氧酶1(HO-1)和辅酶Ⅰ醌类氧化还原酶1(NQO1)的mRNA表达水平等指标,观察番茄红素对Nrf2的核转位及其下游靶基因的激活作用.结果 10 μmol/L番茄红素可显著提高H2O2培养条件下L02细胞的生存率,提高细胞内SOD、GSH-Px酶活性,降低胞内MDA含量及培养液中的ALT、AST、LDH酶活性(P＜0.05),并能提高细胞核蛋白的Nrf2含量及Nrf2靶基因HO-1和NQO1表达水平(P＜0.05).结论 番茄红素可通过促进Nrf2的核转位、增强其下游抗氧化基因的表达从而对H2O2诱导的L02细胞氧化损伤起保护作用.
关键词： 番茄红素 L02细胞 核因子E2相关因子2 抗氧化 过氧化氢 -
大蒜多糖对酒精致人胚肝细胞损伤的保护作用
目的 研究大蒜多糖对健康人胚肝细胞(L02细胞)氧化损伤的保护作用.方法 培养L02细胞,以酒精为氧化剂损伤L02细胞,制成氧化损伤模型.在培养液中加入不同浓度大蒜多糖(10、20、40、80 mg/L),观察细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,细胞中丙二醛(MDA)含量的变化；用RT-qPCR法检测大蒜多糖对人肝细胞中HO-1 mRNA的影响,以Western bloting分析HO-1蛋白的表达量.结果 不同浓度的大蒜多糖均可减少酒精对L02的氧化损伤.肝细胞经100 mmol/L酒精暴露8h后,20、40、80 mg/L大蒜多糖的SOD分别为(3.65±0.42) NU/mg、(4.11±0.16) NU/mg、(4.61±0.23) NU/mg; GSH-Px分另为(75.96±8.96) mg/mg、(81.83±5.70) mg/mg;(89.32±6.35) mg/mg; MDA分别为(1.05±0.16) nmol/mg、(0.99±0.12) nmol/mg、(0.78±0.11) nmol/mg,各项分别与酒精损伤组[ SOD (2.35±0.28) NU/mg、GSH-Px (54.41±8.17) mg/mg、MDA(1.58±0.23) nmol/mg]比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).血红素氧化酶-1(HO-1) mRNA、蛋白表达呈浓度效应依赖性.结论 大蒜多糖对L02细胞氧化损伤具有保护作用.大蒜多糖可能通过提高SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量保护被酒精氧化损伤的肝细胞,呈剂量效应关系.且可通过促进HO-1 mRNA的表达,共同保护肝细胞.
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木犀草素对对乙酰氨基酚诱导的L02肝细胞损伤的保护作用
探讨木犀草素(luteolin,Lut)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的L02肝细胞损伤的保护作用.CCK-8法检测Lut对L02细胞活性的影响;筛选APAP诱导L02细胞损伤的浓度及作用时间;细胞形态学、CCK-8实验和流式细胞术检测分析Lut对APAP诱导的L02细胞凋亡的影响;比色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR检测凋亡相关基因Bax,Bcl-2,caspase-3的表达.结果显示Lut在2.5～40 μmol·L-1不影响L02细胞活性;12 mmol·L-1 APAP作用于L02细胞12 h可用于建立肝细胞损伤模型.与模型组相比,Lut组细胞状态明显改善,胞体增大,贴壁能力恢复明显;细胞凋亡率明显下降;MDA含量显著下降(P＜0.05或P＜0.01),GSH和SOD活性显著提高(P ＜0.05或P＜0.01),同时能够上调Bcl-2及下调Bax,caspase-3 mRNA的表达(P＜0.05或P＜0.01).该实验证明了Lut对APAP诱导的L02细胞损伤有保护作用,其机制可能与其减轻氧化应激反应和抑制细胞凋亡有关.
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仙茅及其有效成分对不同状态L02细胞PXR-CYP3A的影响研究
目的:明确仙茅水提液及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷对正常、虚寒状态L02细胞中PXR-CYP3A的影响,为探讨仙茅在不同状态下药效表达差异的机制奠定基础.方法:分别用正常、虚寒大鼠血清培养L02细胞,诱导正常、虚寒2种状态细胞.仙茅水提液及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷作用于不同状态细胞后,检测不同状态L02细胞PXR蛋白表达和CYP3A活性.结果:MTT法结果显示,仙茅水提液和苔黑酚葡萄糖苷能使L02细胞活力明显增强;仙茅水提液能使正常组L02细胞PXR蛋白表达水平显著降低,苔黑酚葡萄糖苷能使正常组L02细胞CYP3A活性和PXR蛋白表达水平均显著降低;而仙茅水提液能使虚寒组L02细胞CYP3A活性和PXR蛋白表达升高,苔黑酚葡萄糖苷能使虚寒组L02细胞CYP3A活性水平显著降低,使虚寒组细胞PXR蛋白表达水平升高.结论:仙茅作用于虚寒状态L02细胞,能激活PXR诱导CYP3A活性,但对正常L02细胞的PXR及其介导的CYP3A活性没影响或作用相反.
关键词： 仙茅 有效成分 L02细胞 孕烷X受体 药物代谢酶CYP3A -
基于肝细胞毒价检测的何首乌炮制工艺比较研究
采用肝细胞毒价检测方法评价何首乌不同炮制品的毒性,优选炮制工艺.以同一批生何首乌为原料,分别采用高压清蒸、高压黑豆汁蒸、常压清蒸法炮制何首乌,以正常人肝细胞(L02)为模型,细胞毒价为指标,评价不同蒸制方法、蒸制时间的何首乌炮制品肝细胞毒性,并对部分炮制品进行UPLC-MS分析.结果显示,肝细胞毒价检测方法能有效评价何首乌不同炮制品的毒性,不同炮制方法均可减轻何首乌的毒性,高压清蒸3h减毒效果较佳,不同炮制方法对何首乌化学成分的影响不同,3种方法炮制品与生品比较,没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素8-O-β葡萄糖苷、大黄素均有明显降低,其中二苯乙烯苷含量与其毒价变化趋势基本一致.由此可知,何首乌经炮制可减毒,炮制方法、时间对何首乌成分及肝毒性均有影响,且高压清蒸3h减毒效果较佳,建议进一步加强何首乌炮制减毒控制标准研究.
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DNA修复酶hMTH1在乙型肝炎病毒x基因致人肝细胞系L02细胞恶性转化中的意义
目的 通过转摹因细胞模型L02/HBx观察乙型肝炎病毒x基因(HBx)对DNA修复酶hMTH1转录表达的调控及其对人肝细胞系L02细胞生物学特性的影响.方法 传代培养稳定表达HBx的转基因细胞模型ID2/HBx及空白对照组ID2细胞和空载体对照组L02/pcDNA3.1细胞,倒置显微镜下观察各组细胞的形态学特征,以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、流式细胞术枪测各组细胞增殖、细胞周期和凋亡状况,并进行软琼脂克隆形成实验观察细胞的恶性转化能力.同时应用实时定量PCR测定各组细胞DNA修复酶hMTH1的表达水平.结果 镜下观察发现L02/HBx细胞与对照组ID2细胞相比形态发生明显改变.MTT法显示L02/HBx细胞生长速度比两对照组显著加快.流式细胞术结果表明,HBx可加速细胞周期进程、抑制细胞凋亡.软琼脂克隆形成实验发现L02/HBx细胞的克隆形成率明显高于L02细胞和ID2/pcDNA3.1细胞(P<0.05).实时定量PCR检测发现hMTH1在L02/HBx细胞中的表达显著高于L02细胞和L02/pcDNA3.1细胞(P<0.05).结论 HBx可诱导L02细胞发生恶性转化,在此过程中DNA修复酶hMTH1可出现反应性的上调表达.
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芍药苷对乙醇诱导 L02细胞的毒性和氧化损伤保护机制的影响
目的：探讨芍药苷（ PF）对乙醇诱导L02细胞细胞色素P450（ CYP450）2E1表达及脂质过氧化的影响。方法用75 mmol· L－1乙醇体外诱导培养法建立L02细胞损伤模型，检测细胞培养液上清超氧化物歧化酶（ SOD ）和丙二醛（ MDA）含量的变化，用定时定量－聚合酶链反应（ RT－PCR）及细胞免疫化学技术观察芍药苷处理后的乙醇损伤L02细胞中CYP4502E1的表达变化。结果与对照组比较，模型组血清SOD显著降低，MDA增高（P＜0.05），CYP4502E1 mRNA及其蛋白表达明显增强（ P＜0.05）；与模型组相比，芍药苷组SOD增高， MDA降低，CYP4502E1 mRNA及其蛋白表达水平下降（P＜0.05）。结论芍药苷对L02细胞乙醇损伤具有明显的改善作用，减轻脂质过氧化，其作用可能与调节CYP4502E1的表达有关。
关键词： 芍药苷 乙醇 L02细胞 细胞色素P450 2E1 脂质过氧化 -
cAMP-PKA信号通路对L02细胞药物代谢酶CYP3A的调控作用
目的 探讨cAMP-PKA信号通路对细胞色素P4503A(CYP3A)在正常肝细胞L02表达中的作用.方法 102细胞中分别加入8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)10μmol·L<'-1>及抑制剂H-8910μmol·L<'-1>,培养48 h,分别采用完整细胞免疫组化法、Western印迹法和红霉素-N-脱甲基法检测细胞中PKA、孕烷X受体(PXR)及CYP3A的表达.结果 与正常对照组PKA蛋白表达(211±20)、PXR蛋白表达(0.45±0.14)及CYP3A的活性[(0.38±0..2)μmol·min<'-1>·g<'-1>蛋白]相比,8-Br-cAMP 10μmol·L<'-1>处理后,细胞PKA蛋白表达(296±18)升高、PxR蛋白表达(0.69±0.21)升高、CYP3A的活性[(0.43±0.01)μmol·min<'-1>·g<'-1>蛋白]增强;H-89 10μmol·L<'-1>处理后细胞中PKA蛋白表达(176±14)降低,PxR蛋白表达(0.47±0.13)及CYP3A的活性[(0.39±0.05)μmol·min'-1>·g<'-1>]减弱,无统计学差异.结论 cAMP-PKA信号通路可能是药物代谢酶CYP3A的调控途径之一.
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柴胡醋制前后水提组分对L02细胞影响研究
目的 研究柴胡醋制前后水提组分对L02细胞的增殖作用.方法 采用CCK8法分别检测柴胡与醋柴胡水提组分对L02细胞生长的影响.采用生化法测定细胞上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量.结果 CCK8法显示柴胡与醋柴胡水提组分均能抑制L02细胞的生长增殖,且细胞抑制作用与剂量呈正相关,与正常组比较作用显著,且作用强度为柴胡水提组分>醋柴胡水提组分.柴胡水提组分与醋柴胡水提组分作用于细胞24 h后,半数抑制浓度(IC50)分别为1173.87和1205.59 mg·L-1;生化法测定结果显示ALT、AST与LDH含量升高.结论 柴胡醋制前后水提组分均对L02细胞产生毒性作用,且毒性作用强度柴胡水提组分>醋柴胡水提组分.
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壳聚糖基因纳米粒子对L02细胞的作用
目的 研究壳聚糖基因纳米粒子(CNP)、精氨酸化壳聚糖基因纳米粒子(ANP)和十六烷基化壳聚糖基因纳米粒子(HNP)对人正常肝细胞系L02细胞的作用.方法 采用复凝聚方法制备CNP、ANP和HNP,粒度及zeta电位分析仪进行纳米粒子表征.将浓度分别为5、10、30、50μg/ml(以DNA含量计)的各种纳米粒子与L02细胞共育,采用MTT法进行细胞毒性评价,流式细胞分析技术进行细胞凋亡检测.结果 CNP、ANP和HNP的zeta电位为12.10～14.63 mV,粒径约为148.07～179.47 nm.当各基因纳米粒子浓度为30 μg/ml时,细胞存活率开始降低;达到50μg/ml时,存活率降至低.当各基因纳米粒子浓度为30μg/ml时,可以诱导L02细胞发生凋亡,随纳米粒子浓度的升高,凋亡率升高.结论 当达到一定浓度时,CNP、ANP和HNP对L02具有一定细胞毒性,可诱导细胞产生凋亡.
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2-花生四烯酸甘油对L02细胞代谢过程中胰岛素抵抗机制的研究
目的:验证2-花生四烯酸甘油引起L02细胞代谢过程中的胰岛素抵抗及其发生机制.方法:用不同浓度2-花生四烯酸甘油处理L02细胞,使用台盼蓝检测处理对细胞存活率的影响;同时观察细胞油红染色以及检测培养上清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的改变;用分光光度计法检测胞浆内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量;后使用Western Blot鉴定2-花生四烯酸甘油的作用.结果:当2-花生四烯酸甘油为0.25μM,处理24h,其所致L02细胞胰岛素敏感性下降,且细胞存活无明显差异,其中约有75％胞内有大量脂质沉积.比较2-花生四烯酸甘油联合胰岛素处理组和胰岛素处理组,前者处理后L02细胞胞浆内SOD、GSH显著下降,MDA、iNOS显著升高,其培养上清中ATL、AST含量均升高.随后的WB实验结果显示,2-花生四烯酸甘油处理组较未处理组其胞浆内GLUT4、GSK-3B、eNOS升高.结论:2-花生四烯酸甘油可以通过对L02细胞通路蛋白GLUT4、GSK-3B、eNOS的影响引发胰岛素耐受,进而造成细胞的氧化-还原失衡导致细胞的损伤.
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长链非编码RNA lnc-GCLC-1稳定沉默的肝细胞株L02的构建与验证
目的 利用慢病毒载体构建长链非编码RNA lnc-GCLC-1沉默的稳转L02肝细胞株,为研究lnc-GCLC-1功能提供基础.方法 以lnc-GCLC-1为靶点,设计并合成4组双链发卡结构,分别与慢病毒载体psi-LVRH 1GP连接构成重组质粒;转化感受态细胞获取大量重组质粒后电泳、测序鉴定;通过瞬时转染筛选出2个有效的短发卡RNA(shRNA);将重组质粒转染293T细胞后,收集病毒液并感染L02细胞,经嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株.利用荧光显微镜观察细胞绿色荧光情况以检测转染效果,采用Real-time PCR鉴定转染细胞株,并检测lnc-GCLC-1沉默对GCLC mRNA表达的影响.结果 电泳及测序结果表明重组慢病毒载体构建成功;shRNA-2和shRNA-4是有效的shRNA;用0.5 μg/ml嘌呤霉素成功筛选出稳定低表达L02细胞株;在shRNA-2和shRNA-4稳定转染L02细胞株中,lnc-GCLC-1的表达水平均低于阴性载体组(P＜0.05),沉默效率分别为21.3％和64.82％;shRNA-2组和shRNA-4组GCLC的mRNA表达量均低于阴性载体组(P＜0.01).结论 本研究成功构建了lnc-GCLC-1沉默稳转L02细胞株.
关键词： lnc-GCLC-1 沉默 L02细胞 慢病毒载体 -
纳米银对肝细胞体外增殖作用的实验研究
目的 探讨纳米银及其释放的银离子对人肝癌(HepG2)细胞株及人正常肝(L02)细胞株体外增殖的影响.方法 采用CCK-8法检测纳米银(20～640 μg/ml)染毒24、48 h对HepG2细胞及L02细胞两株细胞体外增殖的影响,并以纳米银释放的银离子作为平行对照,以相同银含量的硝酸银溶液及相同包被含量的聚乙烯基吡咯烷酮(polyvinyl pyrrolidone,PVP)溶液分别作为阳性对照和阴性对照.采用LDH法测定纳米银(20～160 μg/ml)染毒24、48 h对两株细胞膜渗透性的影响.结果 纳米银暴露24 h后,HepG2细胞各剂量组和L02细胞160 μg/ml以上剂量组细胞存活率均低于对照组;暴露48 h后,两株细胞各剂量组(除L02细胞染毒20 μg/ml以外)细胞存活率均低于对照组,且均低于相同浓度暴露24 h组(P＜0.05或P＜0.01).纳米银溶液经超速离心法获得的银离子对两株细胞存活率无明显影响,而对应剂量硝酸银溶液的细胞毒性远高于纳米银.两株细胞各剂量组细胞外液LDH活性均高于对照组,且在相同条件下,HepG2细胞外液LDH活性明显高于L02细胞,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 纳米银对HepG2和L02细胞均具有增殖抑制效应,其作用主要由纳米银单体引起,且对HepG2细胞影响更明显.
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纳米银对人肝癌细胞及正常肝细胞增殖与凋亡的影响
目的 探讨纳米银对人肝癌(HepG2)细胞株及人正常肝(L02)细胞株体外增殖与凋亡的影响.方法 向HepG2细胞和L02细胞培养液中分别加入0(对照)～640 μg/ml纳米银溶液染毒24、48 h.采用MTT比色法检测细胞活性;采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率.结果 与对照组比较,染毒24、48 h后纳米银暴露组HepG2细胞和L02细胞的存活率均较低,而凋亡率均较高;且随着纳米银暴露剂量的升高,HepG2细胞和L02细胞的存活率均呈下降趋势,而凋亡率均呈上升趋势.与染毒48 h组比较,染毒24 h后纳米银暴露组HepG2细胞和L02细胞的存活率均较高,而凋亡率均较低.与相同染毒时间HepG2细胞比较,染毒24、48 h后纳米银暴露组L02细胞的存活率均较高,而凋亡率均较低.结论 纳米银对L02细胞有一定的细胞毒性,能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡;但其对HepG2细胞的毒性更强.
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γ-谷维素对过氧化氢诱导L02细胞凋亡的保护作用
目的 探讨γ-谷维素(gamma-oryzanol,γ-Orz)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导人肝细胞(L02)凋亡的保护作用.方法 H2O2建立L02细胞凋亡模型,用不同浓度(0.1,0.2和0.4 mmol/L)γ-Orz对L02细胞进行预处理,检测细胞总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)与产生羟自由基(OH·)的能力,三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase,ATPase)活力以及一氧化氮(nitric oxide,NO)水平;Hoechst33258染色观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞周期变化;琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡过程中DNA的裂解.结果 γ-Orz呈剂量依赖性下调L02细胞产生NO水平,上调OH·的清除能力、ATP酶活力与T-AOC活性,调控各细胞周期的百分比,恢复细胞形态,有效改善H2O2诱导的细胞凋亡.结论 γ-Orz对H2O2致L02细胞凋亡具有保护作用,与其抑制氧化应激,增强ATP酶活力,减少DNA损伤及细胞周期阻滞有关.
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游离脂肪酸对肝细胞ACSL1表达及相关脂代谢的影响
目的 研究游离脂肪酸(FFA)的诱导对L02肝细胞长链脂酰CoA合成酶1(ACSL1)的表达及相关代谢的影响.方法 用含不同浓度(0.2、0.4、0.8 mmol/L) FFA的培养液诱导L02细胞48 h,Western blot检测ACSL1蛋白水平,荧光定量PCR检测ACSL1 mRNA水平,比色法测定甘油三酯(TG)含量、ATP水平和培养上清FFA浓度变化,生化法测定酮体含量和培养上清葡萄糖浓度变化.结果 FFA的诱导可显著提高ACSL1蛋白表达水平(P＜0.01),但对ACSL1 mRNA水平无明显影响(P＞0.05),细胞内TG含量显著升高(P＜0.01或P＜0.05),酮体含量显著升高(P＜0.05),培养上清葡萄糖消耗显著增加(P＜0.01),胞内ATP水平无明显变化(P＞0.05),与0.2 mmol/L、0.4 mmol/L FFA组相比,0.8 mmol/L FFA组培养上清FFA消耗显著增加(P＜0.01或P＜0.05).结论 FFA通过上调ACSL1蛋白表达水平致肝细胞TG蓄积.
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高浓度绿原酸对L02细胞脂质堆积与氧化应激损伤的影响
目的 研究高浓度(＞100 μmol/L)绿原酸(CGA)对正常及非酒精性脂肪肝(NAFLD)状态下L02肝细胞脂质堆积与氧化应激的影响.方法 用666 μmnol/L油酸(OA)-333 μmoUL棕榈酸(PA)处理人正常肝细胞系L02 24h构建体外肝细胞NAFLD模型.正常及模型细胞经CGA (0.5、1、2 mmol/L)处理24 h后,油红O染色检测胞内脂滴的量,定量PCR及Westem blotting检测细胞SREBP-1C、PNPLA3和CYP2E1的mRNA和蛋白表达量,荧光光度法检测胞内活性氧(ROS)的量.结果 正常及NAFLD模型L02细胞经CGA处理后,均浓度依赖性提高了胞内脂滴与ROS的量,以及SREBP-1C、PNPLA3和CYP2E1的mRNA与蛋白表达水平.结论 高浓度CGA (0.5、1、2 mmol/L)处理能促进正常及NAFLD模型L02细胞的脂堆积与氧化应激损伤.
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大蒜多糖对甲醛所致人胚肝细胞损伤的保护作用
目的 探讨大蒜多糖对甲醛致人胚肝细胞L02氧化损伤和遗传损伤的保护作用.方法 采用体外常规培养L02,取对数生长期的细胞进行实验.实验设对照组、甲醛组和低、中、高剂量大蒜多糖保护组,其中大蒜多糖先与细胞预孵8 h后加入0.1 mmoL/L甲醛,置CO2培养箱培养4 h,用单细胞琼脂糖凝胶电泳评价大蒜多糖各浓度实验组处理L02细胞4hDNA的损伤程度;检测细胞培养液中SOD和GSH活力及LDH、MDA和AST的含量.结果 大蒜多糖各保护组与甲醛组比较,Tail Moment和Tail DNA都明显减少,并与大蒜多糖浓度增加呈剂量一效应关系,其差异均有统计学意义(P<0.05);SOD和GSH-Px活力明显升高,LDH、AST和MDA含量均降低(P<0.05).结论大蒜多糖可提高L02细胞抗氧化酶的活性,减轻甲醛所致的氧化损伤和遗传损伤.
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金属氧化物纳米材料对L02细胞和Hep G2细胞毒性预测模型的构建
[目的]应用定量构效关系研究方法分别构建两个可用于预测金属氧化物纳米材料对人正常肝细胞(L02细胞)和人肝癌细胞(Hep G2细胞)毒性的预测模型. [方法]在16种金属氧化物纳米材料中,随机选取12种纳入测试集用于模型构建,另4种纳入验证集用于模型验证,尝试在所研究金属氧化物纳米材料的结构参数和其对L02细胞及HepG2细胞半数抑制浓度(IC50)间分别构建出两个具有统计学意义的纳米定量构效关系模型. [结果]成功地运用一个结构参数核核排斥能构建了一个可用于预测金属氧化物纳米材料对L02细胞毒性的预测模型lgIC50=-0.000 056 2ECORE+3.34(拟合统计量:n=12,F=35.38,R2=0.72,P＜0.005);用传导能以及高轨道能和低轨道能总和的二分之一构建了一个能够用来预测金属氧化物纳米材料对Hep G2细胞毒性的预测模型lgIC50=-0.1EEc+0.307EShit+3.67(拟合统计量:n=12,F=10.53,R2=0.70,P＜ 0.005). [结论]本次构建的两个模型R2均大于0.6,符合模型构建要求,对金属氧化物纳米材料的设计和安全性评价具有一定的参考价值.
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肝水解肽体外生物学活性测定方法优化
优化肝水解肽体外生物学活性检测方法.调整L02细胞浓度到8×104个/ml,以100 μl每孔接种于96孔板中,37℃、5％ CO2条件下贴壁时间为24 h,弃去旧的培养基,加入以不含谷氨酰胺和胎牛血清的RPMI 1640培养基稀释的肝水解肽溶液,作用48h.优化后的方法相对于原方法显著提高了肝水解肽促进L02细胞生长的量效反应关系,能定量评价肝水解肽体外活性.
