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阳和汤治疗卵巢早衰症治验
一、一般资料15例病人均为门诊病人,年龄30～36岁8例,36～40岁7例,病程长3年,短10个月,均反映的症状:头晕眼花,疲乏无力,腰膝酸软,性功能明显减退,均闭经.B超检查子宫缩小,两侧卵巢小于正常,均未发出卵泡.内分泌功能测定,卵泡刺激素(FSH)水平上升,雌二醇(E2)水平低下.二、治疗方法用阳和汤加味:熟地30g,鹿角霜10g,鹿角胶8g(烊化),白芥子9g,肉桂9g,麻黄6g,干姜9g,甘草9g,仙茅18g,阳起石9g,服用3周为1个疗程,3个疗程后评定疗效.
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仙茅多糖的分离纯化及结构分析
目的:对仙茅多糖进行分离纯化,并对其结构进行分析,为仙茅多糖的进一步应用提供理论基础.方法:仙茅根茎经水提、醇沉、冷冻干燥得仙茅粗多糖(XMP),经DEAE-纤维素柱和Sepharose CL-6B凝胶柱色谱纯化得纯多糖XMP-1,采用凝胶渗透色谱、紫外光谱、红外光谱、气质联用等技术对XMP-1的结构进行分析.结果:仙茅多糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖3种单糖组成,其摩尔比为81.2∶ 5.7∶1,多糖质量分数为91.8％,相对分子质量为3 031 Da,不含核酸、蛋白质和色素.具有吡喃特征吸收峰,在水溶液分子中的分子构象可能为自然卷曲结构.结论:仙茅纯多糖是一种分子量较小的中性杂多糖.
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基于临床用药实际的不同状态下仙茅多次给药后血药浓度变化
目的:观察仙茅作用于正常、虚寒两种不同状态大鼠后,其入血成分苔黑酚葡萄糖苷的血药浓度变化差异,探讨仙茅在正常与虚寒状态下体内药代与生物学效应的相关性.方法:SD雄性大鼠随机分为两组,即正常组和虚寒组.连续14 d肌注氢化可的松粉针剂20 mg·kg-1·d-1塑造虚寒大鼠模型.模型成功后,正常/虚寒大鼠连续7d给予仙茅水提液30 g·kg-1,后1次给药后,分别于多点动物交叉眼眶取血,采用高效液相法检测苔黑酚葡萄糖苷血药浓度,并计算药物代谢参数.结果:虚寒组大鼠在给药后20 min,其血药浓度高于正常组大鼠,直到120 min达大血药浓度,其高水平状态一直维持到300 min;且虚寒组大鼠达峰时间(Tmax)、血药浓度-时间曲线下面积(AUG)明显升高(P＜0.05).结论:虚寒组大鼠体内苔黑酚葡萄糖苷浓度始终处于高水平状态,可能为其生物学效应的更好发挥提供了物质基础.
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仙茅对正常/虚寒大鼠孕烷X受体及其介导的药物代谢酶CYP3A和运转蛋白P-gp的影响
目的:明确仙茅对正常、虚寒大鼠孕烷X受体(PXR)调控药物代谢酶CYP3A和转运蛋白P-gp的作用差异,为探讨其药效表达差异机制奠定基础.方法:连续21d肌注氢化可的松粉针剂20mg·kg-1·d-1塑造虚寒大鼠模型.从第15天开始,正常、虚寒大鼠连续7d分别灌胃仙茅大、小剂量(30、20g/kg)水煎液.观察正常和虚寒状态下仙茅对PXR及其介导的药物代谢酶CYP3A和转运蛋白P-gp的影响.结果:仙茅大、小剂量分别给予虚寒大鼠后,能使虚寒大鼠降低的肝脏微粒体CYP3A活性、小肠P-gp及肝脏PXR蛋白表达水平不同程度升高(P＜0.05,P＜0.01).而仙茅大、小剂量分别给予正常大鼠后,各指标变化均不明显.结论:仙茅对虚寒状态的治疗作用可能与其可升高虚寒大鼠PXR及其介导的CYP3A和P-gp有关.
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仙茅及其有效成分对不同状态Caco-2细胞PXR-P-gp的影响
目的:探讨仙茅水提液及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷对正常/虚寒状态Caco-2细胞PXR-CYP3A活性的影响.方法:肌注氢化可的松琥珀酸钠20mg·kg-1·d-1制造虚寒大鼠模型;分别用正常、虚寒大鼠血清培养Caco-2细胞,诱导正常、虚寒两种状态细胞.仙茅水提液(生药0.75mg/mL)及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷(1×10-5mol/L)作用于不同状态细胞后,检测不同状态Caco-2细胞PXR和P-gp蛋白表达.结果:MTT法结果显示,仙茅水提液各浓度(1 000、750、500、250、100μ g/mL)及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷各浓度(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mol/L)对Caco-2细胞没有明显细胞毒性.虚寒组细胞的P-gp蛋白表达较正常组明显降低(P＜0.05);PXR蛋白表达水平有降低趋势,但无统计学意义.仙茅水提液与苔黑酚葡萄糖苷均能使正常和虚寒组细胞P-gp蛋白水平显著升高(P＜0.01),而对PXR蛋白水平没有显著影响.结论:仙茅能使正常及虚寒状态Caco-2细胞P-gp高表达,说明仙茅对Caco-2细胞P-gp有诱导作用.
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附子、肉桂、仙茅对正常大鼠药物代谢酶CYP3A和GST活性的影响
目的:探讨辛热药附子、肉桂、仙茅对正常大鼠药物代谢酶细胞色素P4503A( CYP3A)和谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性的影响,为辛热药性的科学阐释及临床安全合理用药提供依据.方法:SD雄性大鼠随机分为4组,空白组灌服自来水,其他各组分别灌胃附子(12g· kg-1·d-1)、肉桂(30g· kg-1·d-1)、仙茅(20g·kg-1·d-1)水煎液,连续7d后,检测肝、小肠微粒体CYP3A活性及肝微粒体和血浆GST活性.结果:与正常组比,附子、肉桂、仙茅组大鼠肝微粒体CYP3A和GST活性显著升高(P＜0.01),而小肠微粒体CYP3A活性变化不明显,血浆GST活性有下降趋势.结论:附子、肉桂、仙茅能明显升高大鼠肝脏CYP3A和GST活性,可能是其辛热药性表达的生物学基础之一.
关键词： 附子 肉桂 仙茅 细胞色素P4503A 谷胱甘肽-S转移酶 -
仙茅体内代谢过程与药物代谢酶CYP3A的相关性研究
目的:探讨仙茅体内代谢过程与药物代谢酶细胞色素P4503A(CYP3A)的相关性,为进一步研究机体CYP3A活性变化对仙茅性-效表达的影响奠定基础.方法:SD雄性大鼠随机分为2组,即正常组和利福平组.利福平组每天灌胃给予200mg/kg药物混悬液,正常组给予等体积蒸馏水,连续7d,第8天每组各取6只大鼠一次性灌胃仙茅水煎液(20g/kg)后,分别于20、50、90、180min时眼眶取血测仙茅入血成分苔黑酚葡萄糖苷血药浓度,其他大鼠断头处死,取肝、小肠、肾测定CYP3A活性.结果:利福平组大鼠肝微粒体CYP3A活性明显升高(P＜0.05),小肠、肾微粒体CYP3A活性有升高趋势；利福平组大鼠各时间点血药浓度均低于正常组,且在20、50、90时差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:利福平诱导后大鼠肝微粒体CYP3A活性升高,而苔黑酚葡萄糖苷血药浓度明显降低,说明仙茅体内代谢过程与药物代谢酶CYP3A相关.
关键词： 仙茅 细胞色素P4503A 血药浓度 代谢 -
仙茅水提取物灌胃给予大鼠后入血成分研究
目的:测定并确认仙茅水提取物的入血成分.方法:大鼠灌胃给予仙茅水提取物,以HPLC测定不同血浆样品的色谱图,确认入血成分的色谱峰,以HPLC-MS-MS和NMR确定入血成分的结构.结果:苔黑酚葡萄糖苷和仙茅苷是仙茅水提取物的主要成分,含量分别为4.26％和0.96％.其中,苔黑酚葡萄糖苷以原型吸收入血,而仙茅苷等其他成分在本实验色谱条件下未从血中检测到.仙茅苷原型没有入血的原因可能是其在胃中很快被降解为其他成分.结论:仙茅的入血成分为苔黑酚葡萄糖苷,为仙茅的药效物质基础研究以及进一步的体内代谢研究提供参考.
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独取阳明治阳痿
痿的治疗方药虽多,但目前尚无特效疗法.笔者受"治痿独取阳明"的启发,对治疗阳痿有点滴体会,现整理如下,以求正于同道.1典型病案例1刘某,男,46岁,农民1995年4月12日初诊.患阳痿3年,自述因其妻患乳腺癌,精神压力较大,性生活中断一年半后阳事弗能;几经治疗,屡服补肾助阳之品及丙酸睾丸素等,效果不著.查其面色红润光泽,言语气粗,食欲佳,唇舌红,苔黄稍厚欠润,六脉俱滑.思此患者气盛体质,唇舌俱红,苔黄而厚为阳明有热,阳明乃宗筋之所会,阳明热盛宗筋失润,弛纵而致阳痿,非独肾虚也.当以养胃生津,清其阳明之热,佐以兴阳之品.方药:生地黄15g,知母12g,山药15g,竹茹9g,生石膏20g,天花粉12g,陈皮9g,仙茅9g,淫羊藿9g,甘草9g.水煎分两次服.并嘱病人切勿过虑,因病程较长,应树立信心,坚持服药.4月20日复诊,服上方10剂,舌质恢复正常,苔薄略黄,脉仍滑.视其阳明热势渐去,遂于上方中去天花粉、生石膏、竹茹,加麦冬12g、石斛15g、党参9g,改山药为30g,继服15剂后舌质、苔正常,脉缓滑.阴茎已能勃起,但尚不坚.于上方改仙茅、淫羊藿各15g,继服药10剂后性生活恢复正常,随访5年未再复发.
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仙茅炮制历史沿革及现代研究进展
本文以《历代中药炮制资料辑要》为线索,结合历年版《中华人民共和国药典》、1988年版《全国中药炮制规范》和地方中药饮片炮制规范14部、相关古籍34部,对所收载的仙茅炮制方法加以归纳整理,为科学合理选用仙茅炮制品提供参考.仙茅炮制历史悠久,历代有药汁制、米泔水制、酒浸、酒浸焙干、酒蒸等多种炮制方法,而现代应用较多的是酒炙法.仙茅米泔水制为清代及以前常用的炮制方法,文献明确指出该法可去仙茅毒,而现代鲜有研究及应用,其原因有待进一步考证.
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高效液相色谱法测定仙茅中仙茅苷的含量
目的:建立中药材仙茅中仙茅苷含量的反相高效液相色谱法.方法:甲醇为溶剂,超声提取,Sep-Pak C18柱净化,色谱柱Intertsill ODS-3,流动相甲醇-水-冰醋酸(45∶80∶1),流速1.0 mL*min-1,检测波长283 nm.结果:平均回收率为99.2%,RSD=1.7%(n=5),6个不同来源的仙茅药材中仙茅苷的含量在0.11%～0.35%.结论:可作为仙茅药材的质量控制方法.
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仙茅及其有效成分对不同状态L02细胞PXR-CYP3A的影响研究
目的:明确仙茅水提液及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷对正常、虚寒状态L02细胞中PXR-CYP3A的影响,为探讨仙茅在不同状态下药效表达差异的机制奠定基础.方法:分别用正常、虚寒大鼠血清培养L02细胞,诱导正常、虚寒2种状态细胞.仙茅水提液及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷作用于不同状态细胞后,检测不同状态L02细胞PXR蛋白表达和CYP3A活性.结果:MTT法结果显示,仙茅水提液和苔黑酚葡萄糖苷能使L02细胞活力明显增强;仙茅水提液能使正常组L02细胞PXR蛋白表达水平显著降低,苔黑酚葡萄糖苷能使正常组L02细胞CYP3A活性和PXR蛋白表达水平均显著降低;而仙茅水提液能使虚寒组L02细胞CYP3A活性和PXR蛋白表达升高,苔黑酚葡萄糖苷能使虚寒组L02细胞CYP3A活性水平显著降低,使虚寒组细胞PXR蛋白表达水平升高.结论:仙茅作用于虚寒状态L02细胞,能激活PXR诱导CYP3A活性,但对正常L02细胞的PXR及其介导的CYP3A活性没影响或作用相反.
关键词： 仙茅 有效成分 L02细胞 孕烷X受体 药物代谢酶CYP3A -
制首乌水煎剂致不良反应1例
患者程某,男,71岁,2005年9月来我院就诊.症见:腰膝酸软、夜尿频多、乏力.中医诊断:肝肾亏损.治以滋阴补肾.处方:枸杞子20 g、鸡血藤30g、巴戟天15 g、生熟地黄各30 g、仙茅10 g、菟丝子10 g、黄芩10 g、白芍15 g、黄精15 g、制首乌15 g、当归15 g、党参15 g.患者煎服后0.5 h出现胸闷、心悸、气短.1 h后逐渐缓解.下午服后又出现胸闷、心悸、气短现象.马上到医院就诊,体格检查:体温37℃,呼吸40次/min,脉博112次/min,血压125/84 mmHg.约1 h后该症状又消失.
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仙茅中酚苷类成分高效液相色谱法测定方法的建立
目的 建立同时测定仙茅中多种酚苷类化合物的HPLC方法.方法 Angilent 1100高效液相色谱仪,Zorbax SB C18色谱柱；检测波长:230 nm;柱温:30℃；进样量20μL；流速1mL·min-1；流动相:乙腈(A)-0.1％醋酸水溶液(B),梯度洗脱程序为:0～25 min,4％～6％ A; 25～58 min,6％ ～ 17％ A;58 ～ 85 min,17％～22％A.结果 8种酚苷成分5-羟甲基糠醛(1),2-羟基-5-(2-羟乙基)苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),苔黑酚龙胆二糖苷(3),苔黑酚葡萄糖苷(4),苔黑酚-1 -O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),2,6-二-甲氧基苯甲酸(6),仙茅苷(7)和仙茅素A(8)的质量浓度和峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率符合含量测定要求.结论 该方法简便、灵敏、重复性好,适用于同时测定仙茅中多种酚苷类成分.
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仙茅苯甲酸酯类酚苷对维甲酸致大鼠骨质疏松症的影响
目的 探讨仙茅苯甲酸酯类酚苷对维甲酸致大鼠骨质疏松症的作用.方法 3月龄SD雌性大鼠灌胃给予70 mg·kg-1·d-1的维甲酸造模2周,造模结束后给予雌二醇(E2,1 mg·kg-1)、淫羊藿总黄酮(TF,100 mg·kg-1)、仙茅苯甲酸酯类总酚苷(COP,6,18和54 mg· kg-1)、仙茅乙醇提取物(COE,3 000 mg·kg-1)4周.利用双能X线骨密度仪测右侧股骨的骨密度;全自动生化分析仪测定血清和尿液中Ca、P、肌酐(creatinine,Cr)含量及碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性.以Elisa试剂盒测定血清中骨钙素(BGP)和脱氧吡啶啉(DPD)的水平.结果 SD雌性大鼠灌胃给予70mg·kg-1·d-1的维甲酸2周可显著降低大鼠股骨的骨密度,增加尿液中Ca与肌酐的比值和血清抗酒石酸酸性磷酸酶的活性.雌二醇、淫羊藿总黄酮和仙茅苯甲酸酯类总酚苷不仅可显著增加维甲酸骨质疏松大鼠的骨密度,降低尿液中Ca与肌酐的比值和抗酒石酸酸性磷酸酶活性,抑制骨吸收;还可调节维甲酸模型大鼠血清中骨钙素的水平,增加碱性磷酸酶的活性,促进骨形成.结论 仙茅苯甲酸酯类酚苷可通过抑制骨吸收、增加骨形成减少维甲酸骨质疏松大鼠的骨丢失.
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高效液相色谱法测定仙茅中仙茅苷的含量
目的建立高效液相色谱法测定仙茅中仙茅苷的含量.方法 Nova-pakC18(250 mm×4.6 mm,10 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(40∶60),流速为1.0 mL*min-1,检测波长为275 nm.结果仙茅苷在0.348 5～2.788 μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=2×106X+34 221(r=0.999 9)),平均回收率为100.07%,RSD为0.83%.结论本法简便,快速,灵敏,准确,重现性好,可作为仙茅的质量标准.
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仙茅的鉴别
有本草记载称:"仙茅,其原植物的叶似茅,久服身轻如仙,故名."《本草纲目》:"仙茅性热,补三焦、命门之药也.惟阳弱精寒,禀赋素怯者宜之.若体壮相火炽盛者,服之反能动火."来源及采收加工仙茅为石蒜科植物仙茅的干燥根茎.主产于中国四川南部、云南、贵州、广西、浙江、江西、福建、台湾、湖南和广东,在东南亚各国及日本也有分布.每年的2～4月发芽前,或7～9月苗枯萎时挖取根茎,洗净,除去须根和根头,晒干或蒸后晒干.仙茅以条粗、质坚、表面色黑褐者为佳.生用.
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仙茅与民族药铁棒锤的形态组织学鉴别
目的：探讨仙茅与铁棒锤的形态组织学比较。方法运用性状和显微鉴别法对仙茅和铁棒锤进行鉴别。结果二者外形有相似之处，但断面形态、横切面组织构造及粉末显微鉴别有明显差异。结论仙茅与铁棒锤来源和功能完全不同，不可混用。
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酒炙仙茅“热者益热”作用研究
目的 以药效学指标比较仙茅与酒炙仙茅的热性,探索酒炙对仙茅“热者益热”的炮制机制.方法 通过比较仙茅与酒炙仙茅对氢化可的松致肾阳虚寒症模型大鼠血清中肾上腺素(Adr)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、cAMP/cGMP值、三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素(TSH)、睾酮(Ts)、Na+,K+-ATP酶、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)及三酰甘油(TG) 16种指标的影响来判定仙茅的热性以及酒炙仙茅“热者益热”的炮制机制.结果 仙茅可以有效降低氢化可的松致肾阳虚寒症模型大鼠血清中TG、cGMP的量,提高大鼠血清中Adr、NE、DA、5-HT、cAMP、cAMP/cGMP值、T3、T4、TSH、Ts、Na+,K+-ATP酶、Glu、TC、TP 14种指标的量;酒炙仙茅较仙茅组在提高Adr、NE、5-HT、cAMP、T3、T4、TSH、Ts、Na+,K+-ATP酶、Glu、TC、TP 12种指标方面效果更加显著,存在明显差异(P＜0.05、0.01).结论 仙茅酒炙后热性增强,“热者益热”理论成立.热性增强是由增强机体物质能量代谢、提高中枢神经递质和交感-肾上腺轴、环核苷酸水平及垂体-靶腺轴功能所致.
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苔黑酚葡萄糖苷对L02细胞肝药酶CYP3A的调控作用研究
目的 观察苔黑酚葡萄糖苷对体外培养的正常肝细胞株L02中CYP3A的影响,探讨苔黑酚葡萄糖苷是否通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的活性.方法 分别用cAMP-PKA信号通路中蛋白激酶A(PKA)激动剂环腺苷酸(cAMP)类似物8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)及其抑制剂H-89、苔黑酚葡萄糖苷干预L02细胞,MTT法检测细胞活力,完整细胞免疫组化法检测PKA蛋白表达,红霉素-N-脱甲基法检测CYP3A活性,Western blotting检测细胞中孕烷X受体(PXR)蛋白表达.结果 与对照组(加入不含药的无血清培养基)相比,苔黑酚葡萄糖苷处理后的细胞CYP3A的活性增强,PKA、PXR蛋白表达增强,与8-Br-cAMP的作用相似.结论 苔黑酚葡萄糖苷可通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的表达,表明其可能是仙茅表现出辛热药性的主要成分之一.
关键词： 苔黑酚葡萄糖苷 仙茅 肝L02细胞 cAMP-PKA信号通路 CYP3A
