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肠毒素C2第20和22位氨基酸对其超抗原活性的影响
目的：揭示突变蛋白SEC2（T20L／G22E）超抗原活性较野生型SEC2显著增强的潜在机制。方法：WST-1法检测突变蛋白SEC2（T20L／G22E）在体外刺激小鼠脾淋巴细胞增殖活性，进一步应用流式细胞术和荧光定量PCR技术分别检测CD4＋和CD8＋T淋巴细胞增殖、特异性VβT淋巴细胞增殖以及相关细胞因子mRNA丰度变化。结果：与野生型SEC2相比，突变蛋白SEC2（T20L／G22E）能够在体外显著刺激小鼠脾淋巴细胞增殖，但二者具有相似的特异性VβT淋巴细胞增殖谱，并且SEC2（ T20L／G22E）能够较rSEC2激活更多携带有Vβ5.3、Vβ8.1及Vβ8.3的T 淋巴细胞；进一步体内实验发现 SEC2（T20L／G22E）能够较rSEC2激活更多外周血和脾脏中CD4＋和CD8＋T淋巴细胞增殖及相关细胞因子的表达。结论：突变蛋白SEC2（T20L／G22E）超抗原活性增强的机制可能是用亮氨酸和谷氨酸替代原来20和22位上的氨基酸后提高了SEC2（T20L／G22 E）与特异性TCR-Vβ的亲和力，进一步激活更多的SEC2特异性T淋巴细胞，终引起T淋巴细胞亚型的显著性增殖，同时诱导更多与抗肿瘤、增殖相关的细胞因子的表达。
关键词： 金黄色葡萄球菌肠毒素C2 超抗原 T淋巴细胞 细胞因子 -
金黄色葡萄球菌肠毒素 C2对兔骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的实验研究
目的观察不同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素C2（ SEC2）对体外兔骨髓间充质干细胞（ rBM-SCs）的诱导分化作用。方法以梯度密度离心法获得rBMSCs并通过激光共聚焦对细胞进行形态学鉴定后传代培养，分别应用1、10、100、500μM SEC2处理细胞，检测各组细胞的碱性磷酸酶（ ALP）活性；四甲基偶氮唑蓝（ MTT）比色法检测各组细胞的增殖情况；逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）法检测骨桥蛋白和胶原蛋白的基因表达。结果 rBMSCs 在应用SEC2诱导时，随着浓度的增加， rBMSCs 的增殖逐渐被抑制，其中100μM SEC2共培养细胞增殖情况明显高于对照组（P＜0.01）；应用100μM SEC2诱导rBMSCs 16d后，成骨诱导检测茜素红染色可见矿化和钙沉积；同时进行RT-PCR 检测，随着培养时间的延长，骨桥蛋白（ Os-teopontin）和胶原蛋白-1（Collagen I）有明显上调趋势，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 SEC2能够使rBMSCs成骨分化，分化的效果与肠毒素剂量及诱导时间相关。
关键词： 金黄色葡萄球菌肠毒素C2 骨髓间充质干细胞 成骨分化
