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NK细胞负向调控适应性免疫应答研究进展
自然杀伤细胞（ Natural killer cells，NK cells)是机体重要的天然免疫细胞，可以通过直接杀伤作用或分泌多种细胞因子来抵抗病毒感染或肿瘤细胞，从而维持机体稳态。大量研究表明，NK细胞在免疫应答中也可以通过影响多种免疫细胞应答来改变免疫状态，一方面NK细胞可以与免疫细胞直接接触，另一方面NK细胞通过影响病毒载量等方式起到促进或抑制适应性免疫应答的作用。 NK细胞正向调控适应性免疫应答的功能已被人们所熟知，其负向调控功能直到近年才被关注。本文根据已有文献，综述了NK细胞负向调控适应性免疫应答中的效应细胞及功能机制，并阐述这种调控作用对机体后续抗感染或抗肿瘤免疫应答的影响。
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微小RNA调控肿瘤细胞耐药机制形成的研究进展
目前,多数恶性肿瘤常规化疗效果差、预后不良,是困扰临床工作的重要难题,而肿瘤细胞耐药性的产生是导致化疗失败的重要原因之一.经过积极化疗后,残存肿瘤干细胞耐药性的存在,可导致肿瘤细胞对多数化学药物敏感性降低,引起肿瘤复发、转移,终危及患者生命.肿瘤细胞耐药性的形成机制较为复杂,涉及的信号分子及信号通路相对较多,其具体机制尚未完全阐明.根据目前相关研究,微小RNA(miRNA)与肿瘤耐药性的形成高度相关.miRNA通过对耐药机制进行靶向调节,对减少肿瘤细胞耐药性形成起着非常重要的作用.笔者拟就目前miRNA调控肿瘤细胞耐药机制形成的研究进展进行综述.
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肌细胞增强因子2D通过负向调控有丝分裂诱导基因6的表达促进肝癌细胞PLC/PRF5和SMMC7721的增殖和迁移
目的：观察肌细胞增强因子2D( myocyte enhancer factor 2D,MEF2D)对肝癌细胞PLC/PRF5和SMMC7721增殖和迁移的影响,并探究其是否通过负调控有丝分裂诱导基因6( mitogen-induced gene 6,MIG6)的表达发挥作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应技术分别检测肝癌细胞中MEF2D和MIG6转录水平的表达,以MEF2D mRNA表达量作为横坐标,以MIG6 mRNA表达量作为纵坐标,制作线性相关图；用小干扰RNA( small interfering RNA,siRNA)在PLC/PRF5细胞中下调MEF2D和MIG6后,通过细胞增殖与毒性测定试剂盒(7Sea-Cell Counting Kit,7Sea-CCK)和细胞划痕法检测肝癌细胞增殖和迁移能力；用siRNA在PCL/PRF5细胞中下调MEF2D、用MEF2D过表达质粒在SMMC7721细胞系中上调MEF2D后,通过蛋白印迹检测法分别检测MEF2D和MIG6的蛋白质表达水平。根据实验,共分为阴性对照( negative control,NC)组、siMIG6组、siMEF2D组、si2M(同时下调MIG6和MEF2D)组、空白对照组、空载对照组、MEF2D组7组。结果肝癌细胞hcclm3、SMMC7721、PLC/PRF5、HepG2、7703、Huh7、Bel-7402中MEF2D mRNA、MIG6 mRNA表达水平呈现负相关关系(r＝－0.78)。细胞增殖实验,24 h和48 h时,下调MIG6或MEF2D后,与NC组比较,siMIG6组或siMEF2D组中PLC/PRF5细胞增殖能力无显著变化；同时下调MIG6和MEF2D后,与siMEF2D组比较,si2M组中PLC/PRF5细胞增殖能力无显著变化。72 h 时,各组间方差分析差异有统计学意义( F＝20.68、P<0.01)；下调MIG6后,与NC组比较,siMIG6组中PLC/PRF5细胞增殖能力显著增强[光密度( optical density, OD)值为3.73±0.18,t＝3.84、P＝0.02]；下调MEF2D后,与NC组比较,siMEF2D组中PLC/PRF5细胞增殖能力显著下降(OD＝1.79±0.22,t＝3.95、P＝0.02)；同时下调MIG6和MEF2D后,与siMEF2D组比较,si2M组中PLC/PRF5细胞增殖能力增强(OD＝2.99±0.03,t＝4.83、P<0.01)。细胞划痕实验,各组间方差分析差异有统计学意义( F＝42.27、P<0.01)；48 h时,下调MIG6后,与NC组比较,siMIG6组中PLC/PRF5细胞迁移能力显著增强[细胞迁移率为(51±4)％,t＝3.22、P<0.05)]；下调 MEF2D 后,与 NC 组比较,siMEF2D 组中 PLC/PRF5细胞迁移能力显著下降[细胞迁移率为(19±3)％,t＝7.70、P<0.01]；同时下调MIG6和MEF2D后,与siMEF2D组比较,si2M组中PLC/PRF5细胞迁移能力增强[细胞迁移率为(46±3)％,t＝6.99、P<0.01]。蛋白质印迹检测,下调MEF2D后,与NC组比较,siMEF2D组中PLC/PRF5细胞MIG6蛋白表达水平显著上升( t＝7.86、P<0.001)；上调MEF2D后,与空载对照组比较,MEF2D组中SMMC7721细胞MIG6蛋白表达水平显著下降( t＝4.61、P＝0.004)。结论肝癌细胞PLC/PRF5和SMMC7721中MEF2D和MIG6表达量呈负相关关系,MEF2D很可能通过负向调控MIG6的表达从而促进肝癌细胞PLC/PRF5和SMMC7721增殖和迁移。
