首页 > 文献资料
-
PCR结合反向膜杂交快速鉴定临床常见念珠菌方法学的建立
目的 建立PCR结合反向膜杂交技术快速检测临床常见致病念珠菌的方法.方法 根据真菌rDNA高度可变区设计白色念珠菌、热带念珠菌,近平滑念珠菌,都柏林念珠菌,光滑念珠菌、克柔念珠菌的种特异性探针,加尾后固定在尼龙膜上,生物素标记的通用引物扩增转录间隔区ITS1,利用反向膜杂交技术快速检测念珠菌种群.结果 以上六种念珠菌均能扩增出大小为218 bp的条带,每张膜上只有与靶序列对应的探针点有阳性结果,其他探针点均为阴性.正常人类基因组DNA及临床常见的几种细菌DNA扩增结果均为阴性.结论 PCR结合反向膜杂交技术方法学的建立,可以快速检测临床常见致病的念珠菌.该方法特异性高,耗费时间短.可以快速、准确的为临床抗真菌药物的使用提供指导依据.
-
HPV的检测与分型
目的 探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的检测与分型.方法 以PCR技术为基础,采用反向膜技术对HPV感染的病人标本和非感染标本进行检测.结果 PCR结果与临床检验的阴阳性结果相吻合,反向膜技术可检验出多个型的HPV.结论 PCR和反向膜杂交技术相结合可快速准确检测HPV病毒.
-
反向膜杂交技术检测结核分枝杆菌耐药株的临床价值研究
目的 评价反向膜杂交技术对于肺结核病患者的结核分枝杆菌耐药基因检测的临床应用价值.方法 利用反向膜杂交技术检测了40株耐药结核分枝杆菌培养分离株、10株非结核分枝杆菌培养分离株、240例肺结核患者痰标本的rpoB 、katG,、inhA突变基因.240例痰标本同时进行结核菌培养.106株膜芯片检测阳性样本测序验证. 结果 特异性方面:膜芯片检测40株结核分枝杆菌培养分离株,均为阳性;10株非结核分枝杆菌培养分离株,均为阴性.灵敏度方面:膜芯片检测240例临床痰标本中,66例结核分枝杆菌阳性,占27.5%.耐药基因准确性方面:106例膜芯片检测阳性的样本进行测序验证,两者结果完全一致.结论 反向膜杂交技术可快速检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变基因,与常规结核分枝杆菌培养、测序检测耐药基因的结果相符,可应用于临床.
-
佛山地区孕产妇 G6PD 基因缺陷调查及干预模式研究
目的：调查佛山地区孕产妇葡萄糖‐6‐磷酸脱氢酶（G6PD ）缺陷状况，探讨干预指导模式的效果。方法选择2013年4～12月到该院产检的孕产妇及其丈夫各1646例，以反向膜杂交法检查夫妇双方的G6PD基因、以生化仪法检测G6PD活性，分析两性基因突变率、酶活性缺陷率，给予遗传咨询指导并跟踪随访新生儿G6PD基因突变与酶活性低下情况。结果 G6PD基因突变率男性4．7％，女性2．3％；G6PD酶活性缺陷率男性3．5％，女性1．6％；G6PD 基因突变发生较高的位点是 G1376T （36．2％）、G1388A （21．6％）、A95G （13．7％）和 G1024T （11．2％）。结论佛山地区是G6PD缺陷高发地区，G1376T、G1388A、A95G和G1024T是主要的点突变类型。
-
PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌的临床意义
目的探讨聚合酶链反应(PCR)反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌(TB)DNA的价值.方法用PCR反向膜杂交技术检测522例结核及60例非结核患者临床标本中的TB-DNA,同时用培养、抗酸染色涂片及常规PCR法作对照.结果PCR反向膜杂交法阳性率为80.6%(556/690),培养为18.1%(125/690),镜检为13.9%(96/690),常规PCR为59.6%(411/690),PCR反向膜杂交法与常规法比较(P＜0.001),差异具显著意义.PCR反向膜杂交法阳性检出率高于常规PCR,差异具显著意义(P＜0.001);该技术假阳性为零.结论PCR反向膜杂交技术检测临床标本中TB-DNA具有快速、高度特异性和敏感性,可为结核病的临床早期诊断提供一种新的病原学诊断手段.
-
PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌
目的探讨结核分枝杆菌(TB)PCR反向膜杂交技术的临床应用价值.方法采用该技术对本院300例确诊结核的或高度怀疑为结核分枝杆菌感染的病人标本、60例非结核住院病人标本进行检测,同时用培养镜检法、常规PCR法作对照试验.结果PCR反向膜杂交法检出TB菌176例、阳性率(58.7%),比培养镜检法47例(15.7%)、常规PCR法156例(52.0%)检出率高,而对60例证实无结核分枝杆菌的标本、几种方法检测均为阴性.结论该技术能快速、敏感和高度特异地检测临床标本中的TB菌.
-
聚合酶链反应反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌的临床意义
目的探讨聚合酶链反应(PCR)反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌(TB)DNA的价值.方法用PCR反向膜杂交技术检测522例结核及60例非结核患者临床标本中的TBDNA,同时用培养、抗酸染色涂片及常规PCR法作对照.结果PCR反向膜杂交法阳性率为80.6%(411/690),培养为18.1%(125/690),镜检为13.9%(96/690),常规PCR为59.6%(411/690),PCR反向膜杂交法与常规法比较(P＜0.001),差异有显著意义.PCR反向膜杂交法阳性检出率高于常规PCR(P＞0.05),但差异无显著意义;该技术假阳性为零.结论PCR反向膜杂交技术检测临床标本中TB-DNA具有快速、高度特异性和敏感性,可为结核病的临床早期诊断提供一种新的病原学诊断手段.
-
PCR反向膜杂交技术检测乙型肝炎病毒
目的探讨PCR反向膜杂交技术在乙型肝炎病毒(HBV DNA)检测中的应用.方法用PCR反向膜杂交技术定性检测100例血清标本中的HBV DNA,结果与常规PCR法和酶联免疫吸附测定(ELISA)方法比较.结果 100例血清标本,本法阳性率为53.0%,常规PCR法为47.0%.HBsAg(+)和HBeAg(+)与HBV DNA有很好的相关性.结论该技术能快速、敏感和高度特异地对PCR产物进行鉴定,亦可检测HBV的真实感染和复制情况,有助于乙型肝炎的临床诊断.
-
反向膜杂交基因法检测解脲支原体在生殖泌尿道炎诊治中的意义
近年来,解脲支原体感染已引起广泛注意,并证实可导致非淋球菌性尿道炎、阴道炎,故对解脲支原体感染的及时诊断和治疗在临床上具有一定价值.
-
反向膜杂交技术快速检测质粒介导喹诺酮耐药基因qnr方法的建立
目的 结合PCR与反向膜杂交技术,探讨建立快速筛查细菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因qnr的方法.方法 将qnr各亚型的特异性探针加尾后固定于尼龙膜上,用标记生物素的各亚型引物分别扩增经提取的细菌DNA,与固定在膜上的探针杂交.结果 25株qnr阳性菌株中,有6株qnrA阳性菌株,9株qnrB阳性菌株,10株qnrS阳性菌株.所有阳性菌株均能通过反向膜杂交检测到相应的qnr基因的亚型,且可以在同一张膜上进行检测.结论 该方法能够快速、准确地检测出临床病原微生物中质粒介导的喹诺酮类耐药基因qnr,这对于指导临床及时合理用药,采取措施防止耐药菌的传播均有重要意义.
