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腺相关病毒介导的CDK2-shRNA促进黑色素瘤细胞A375凋亡
目的 探讨腺相关病毒介导的CDK2-shRNA对人黑色素瘤细胞A375凋亡,为黑色素瘤的防治提供技术支持.方法 体外合成CDK2及转录终止序列,构建CDK2-shRNA的腺相关病毒载体和包装相应的重组腺相关病毒,荧光显微镜检测转染和感染条件下CDK2-shRNA表达效果,MTT法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡,免疫印迹检测cyclin E和E2F1表达.结果 转染和感染的腺相关病毒介导的CDK2-shRNA在A375细胞均有表达且具有较低的细胞毒性;转染和感染的CDK2-shRNA均促进A375细胞发生凋亡;干扰CDK2可降低cyclin E和E2F1表达.结论 相关病毒介导的CDK2-shRNA促进黑色素瘤细胞A375凋亡.
关键词： 腺相关病毒 Cdk2 黑色素瘤细胞A375 细胞凋亡 -
木犀草素诱导黑色素瘤细胞凋亡机制的探讨
目的:探讨了木犀草素对酪氨酸酶的抑制作用和诱导黑色素瘤细胞凋亡机制.方法:本文采用酶抑制动力学方法,对木犀草素诱导酪氨酸酶活性降低的机制进行了研究,并结合分子模拟和螯合铜离子实验初步探讨了木犀草素与酪氨酸酶的结合机理,后进行了黑色素瘤细胞A375的生长抑制试验.结果:木犀草素对酪氨酸酶具有良好的抑制作用(半抑制浓度IC50为51.54±3.42 μmol/L);通过螯合铜离子实验发现,木犀草素能够与酪氨酸酶的活性中心铜离子发生结合作用;分子模拟结果表明,木犀草素能够优先结合到酪氨酸酶的活性中心Cu离子附近,并与催化基团His85形成氢键;木犀草素能够明显的诱导A375的凋亡,且细胞中的酪氨酸酶活性和黑色素的合成量降低.结论:木犀草素作为一种酪氨酸酶抑制剂,诱导了酶活性的降低和黑色素瘤的凋亡,对调节黑色素水平起到重要作用.
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家蝇胚胎细胞抗菌蛋白对肿瘤细胞A375抑制作用的研究
目的:研究家蝇胚胎抗菌蛋白对肿瘤细胞A375生长的抑制作用.方法:利用脂多糖诱导家蝇胚胎细胞提取抗菌蛋白,将提取的抗菌蛋白用PBS配制成40、80、160、320及640 μg/mL 5个浓度组,做黑色素瘤细胞A375的MTT实验,实验组采用等量PBS,观察家蝇胚胎细胞抗菌蛋白对A375的抑制作用,以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组.结果:MTT检测显示五种浓度抗菌蛋白对A375均有抑制作用,与阴性组相比P＜0.05,差异有显著性.各浓度组对人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用,与阴性组相比P ＞0.05,差异无显著性.结论:家蝇胚胎细胞抗菌蛋白对肿瘤细胞A375具有明显抑制作用,而对正常人体细胞无抑制.
关键词： 家蝇胚胎细胞 抗菌肽 抗菌蛋白 黑色素瘤细胞A375 人脐静脉血管内皮细胞 抑瘤活性
