首页 > 文献资料
-
过表达Runx2基因对牙髓细胞分化相关基因的影响
目的 探讨Runt相关转录因子(Runx)2基因在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化过程中的作用.方法 通过矿化诱导培养基(1μmolβ-磷酸甘油钠、10-6μmol地塞米松和5 mg抗坏血酸)建立牙髓细胞向成牙本质细胞分化模型,通过检测碱性磷酸酶(ALP)的活性鉴定模型.将过表达载体pcDNA3.1-Runx2和空载体pcDNA3.1(阴性对照组)转染牙髓细胞,蛋白质免疫印迹法检测转染后细胞中Runx2蛋白的表达量;实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中成牙本质细胞分化相关基因牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨涎蛋白(BSP)mRNA的表达.结果 在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化的过程中,ALP的活性含量逐渐增加,第14天的水平显著大于第7天(P<0.05).与阴性对照组相比,pcDNA3.1-Runx2组细胞中Runx2蛋白的表达量显著升高(P<0.05);在分化诱导的第7和14天,细胞中DSPP mRNA(P<0.05)、BSP mRNA(P<0.05)均显著高于阴性对照组.结论 Runx2通过增加成牙本质细胞分化相关基因的表达,从而促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化.
-
遗传性牙本质发育不全Ⅱ型家系DSPP基因突变的检测与分析
目的:对2个汉族遗传性牙本质发育不全Ⅱ型家系中的DSPP基因突变进行检测.方法:对2个遗传性牙本质发育不全Ⅱ型(DGI-Ⅱ)家系的成员进行全身基本情况及口腔专科检查,拍摄口内照,全景片,以及牙片,采集外周静脉血并抽提基因组DNA,应用PCR及DNA测序技术,结合序列分析方法,对2个家系共15名家系成员(其中患者10名)的外周静脉血基因组DNA牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因1～5号外显子及其邻近序列进行序列分析.结果:家系A中的患者在DSPP的第2外显子发生错义突变c.50C＞T(p.P17L);家系B的患者在DSPP第4外显子发生错义核苷酸改变c.506A＞G(p.D169G).结论:DSPP基因突变可能是导致两个DGI-Ⅱ家系发病的分子基础.
-
EMPs对人牙髓干细胞增殖分化影响的实验研究
目的:将人牙髓干细胞(human Dental Pulp Stem Cells,hDPSCs)与釉基质蛋白(Enamel Matrix Proteins,EMPs)按一定浓度结合,测定牙本质涎磷蛋白(dentin sialoprotein,DSPP)、波形蛋白(vimentin)、碱性磷酸酶(alkaline phophatase,ALP)的表达,阐述EMPs对人牙髓干细胞增殖分化的影响.方法:分别将浓度为100 μg/mL、200μg/mL的EMPs加入培养中的人牙髓干细胞中,分别于3d、5d、7d、9d、11d对细胞进行免疫组化染色,检测细胞爬片DSPP、vimentin、ALP的表达.结果:未经EMPs诱导的人牙髓干细胞DSPP少量细胞阳性表达,vimentin表达阴性,ALP表现低活性.经200 μg/mL的EMPs诱导5d后,人牙髓干细胞DSPP、vimentin染色呈阳性表达,ALP活性明显增加.结论:EMPs对人牙髓干细胞增殖及分化具有促进作用,200 μg/mL的浓度效果为显著.
