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H520细胞文献资料
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Keap1/Nrf2信号通路对人肺鳞癌细胞生长、转移和耐药的影响
目的 探讨Keap1/Nrf2信号通路对人肺鳞癌细胞株H520生长、转移和耐药的影响.方法 使用慢病毒转染体系建立稳定高表达Keap1的H520细胞株模型(H520-Keap1),同时以Keap1失活的细胞株(H520-GFP)为阴性对照组;采用Western印迹法检测各组细胞中Keap1、Nrf2蛋白表达,RT-PCR检测Keap和Nrf2下游靶基因mRNA表达;通过SRB比色法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、体外细胞药敏实验分别检测各组细胞生长、转移和耐药情况.结果 H520-Keap1细胞中Keap1蛋白表达量明显高于H520-GFP细胞,Nrf2蛋白表达量明显低于H520-GFP细胞(P<0.01).H520-Keap1细胞中Keap1 mRNA表达量明显高于H520-GFP细胞,H520-Keap1细胞中Nrf2下游靶基因Akr1c1、Nqo1、Gclc、Gclm mRNA相对表达量明显高于H520-GFP细胞(P<0.01).SRB比色法检测显示,第1~3天,H520-GFP与H520-Keap1细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05);第4天起H520-Keap1细胞增殖率明显低于H520-GFP(P<0.05).H520-GFP细胞迁移率明显高于H520-Keap1细胞(P<0.01);H520-GFP细胞的侵袭数明显高于H520-Keap1细胞(P<0.01).H520-Keap1细胞对卡铂、吉西他滨的敏感性增加.结论 Keap1过表达可影响人肺鳞癌H520细胞中Nrf2及其下游靶基因表达,抑制癌细胞生长和转移,提升对卡铂和吉西他滨的敏感性.
