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microRNA-181 c在重症肌无力患者外周血单个核细胞中的表达及其意义
目的 探讨microRNA-181c(miR-181c)在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者中的表达水平及其临床意义.方法 收集2015年6月-2017年6月收治的22例MG患者和20例健康人的外周静脉血样,提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中总RNA,采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测PBMC中miR-181c的相对表达水平,并分析miR-181c表达水平与患者的MG定量评分体系(quantitative myasthenia gravis score,QMG)的相关性.结果 MG患者PBMC中miR-181c的相对表达水平(0.303±0.150)较对照组(1.000±0.262)显著降低(P<0.01),其中全身型患者(0.182±0.056)低于眼肌型患者(0.404±0.126)(P<0.05),同时miR-181c表达水平与QMG呈负相关(R2=-0.359,P<0.05).结论 MG患者PBMC中miR-181 c表达水平的降低可能与病情严重程度有关.
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胃癌组织中miR-181c基因甲基化的研究
目的:通过比较对照组与胃癌组miR-181c基因启动子区的甲基化状态以及Pre-miR-181c、NOTCH4和KRAS的表达变化,初步探讨胃癌发病机制,寻找胃癌发生标记物.方法:选取60例新鲜胃镜活检标本,其中胃癌组30例,男18例,女12例,平均年龄58岁.正常对照组(正常或浅表性胃炎)30例,男14例,女16例,平均年龄54岁.应用甲基化特异性PCR法(MSP)检测组织标本中miR-181c基因启动子区的甲基化状态,并用RT-PCR法检测组织中Pre-miR- 181c、NOTCH4和KRAS的表达.结果:胃癌组miR-181c基因启动子区的高甲基化率明显高于对照组(P＜0.05)；胃癌组Pre-miR- 181c基因表达较对照组显著下降(P＜0.05),胃癌组NOTCH4和KRAS基因表达较对照组显著升高(P＜0.05).结论:胃癌中miR-181c可能通过甲基化作用低表达或不表达,并且通过调节靶基因NOTCH4和KRAS的表达情况,在胃癌形成过程中起着重要的作用.miR-181c的甲基化状况可能成为胃癌发生、发展的标记物.
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m ir-181c抑制神经母细胞瘤的作用机制研究
目的：研究mir‐181c在神经母细胞瘤（NB）中的调控机制。方法采取实时 PCR（RT‐PCR）、细胞存活实验（MTT）、集落形成试验、Transwell试验。结果 mir‐181c下调在原发NB组织比在转移NB组织中更显著。功能性研究显示mir‐181c超表达抑制NB细胞增殖、迁移和侵袭。结论 mir‐181c在NB中表达下调，mir‐181c高表达抑制NB细胞生长，转移和侵袭。
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mir-181c靶向作用 Smad7在神经母细胞瘤中的调控机制研究
目的：探索mir‐181c在神经母细胞瘤（NB）中的调控机制。方法绿色荧光蛋白报告基因分析（EGFP），免疫蛋白印迹分析（western blot），实时PCR（RT‐PCR），细胞存活实验（MTT），Transwell试验。结果 EGFP ，RT‐PCR和West‐ern blot验证Smad7是mir‐181c的直接靶基因。mir‐181c在mRNA和蛋白水平上均降低smad7表达。后，功能性测试表明，mir‐181c过度表达抑制Smad7表达量，重要的是Smad7的超表达可以恢复和诱导mir‐181c的抗肿瘤作用。我们研究证明了mir‐181c通过Smad7蛋白抑制NB细胞的生长和转移，充当一种肿瘤抑制基因。结论 mir‐181c靶向作用于Smad7抑制其表达，达到抑制肿瘤的目的。
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胃癌组织中靶向Abl相互作用蛋白-1的microRNA筛选
目的 检测3种Abl相互作用蛋-1(ABI-1)相关的microRNA(miRNA)在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达模式,筛选出与胃癌组织相关的靶向ABI-1的miRNA.方法 收集59例胃癌术后蜡块标本,包含胃癌组织和癌旁正常组织,抽提石蜡组织中的总RNA.在基因网选择ABI-1相关的miRNA(即miR-181c、miR-148b、miR-9),采用逆转录实时荧光定量PCR法对胃癌组织及癌旁正常组织中的3种miRNA进行检测,计算胃癌组织相对癌旁正常组织中miRNA的相对表达量(2-△△Ω).结果 miR-181c、miR-148b、miR-9在胃癌组织中的相对表达量分别为(2.32±1.04)(P=0.000)、(0.82±0.67)(P=0.321)、(1.07±0.95)(P =0.774),其中miR-181C在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达差异有显著性(P=0.000).结论 miR-181c在胃癌组织中相对高表达,提示其可能作为靶向ABI-1的miRNA调节ABI-1蛋白的表达,为进一步研究靶向ABI-1miRNA在胃癌发生发展中的作用奠定基础.
