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五味子脂A增强卡铂对人卵巢癌Skov3细胞的促凋亡作用及其机制
目的:探讨五味子脂A (GA)与卡铂(CBP)联合应用对卵巢癌Skov3细胞凋亡的影响,阐明GA的协同抑瘤作用.方法:采用不同浓度GA和CBP单独及联合对卵巢癌Skov3细胞株进行干预,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,根据其结果选择GA和CBP合适浓度.卵巢癌Skov3细胞分为对照组、GA(0.04 μmol·L-1)组、CBP (16 mg·L-1)组、GA (0.04μmol· L-1)联合CBP (16 mg·L-1)组(联合用药组),药物处理48 h后,观察各组细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,TUNEL染色观察细胞凋亡指数(AI),JC-1染色观察细胞线粒体膜电位变化,RT-PCR和Western blotting法检测凋亡相关基因Bax、ccaspase-3和Stat3 mRNA和蛋白表达水平.结果:GA联合CBP作用后细胞增殖抑制率高于GA和CBP单独应用组(P＜0.01),且GA及CBP浓度分别为0.04μmol·L-1和16 mg·L-1时量效比佳(细胞增殖抑制率为52.1％).与对照组比较,GA组和CBP组细胞折光性减弱,细胞回缩明显,部分脱落呈悬浮状;联合用药组细胞回缩现象更为明显,并见大量脱落细胞.流式细胞术和TUNEL检测,与对照组、GA组和CBP组比较,联合用药组Skov3细胞凋亡率和AI均明显升高(P＜0.05或P＜0.01).JC-1染色检测,与GA组和CBP组比较,联合用药组Skov3细胞线粒体膜电位降低.RT-PCR和Western blotting法检测,联合用药组细胞中Bax和caspase-3mRNA和蛋白表达水平高于对照组、GA组和CBP组(P＜0.05),Bcl-2 mRNA和Stat3 mRNA及蛋白表达水平低于对照组、GA组和CBP组(P＜0.05).结论:GA能增强CBP对卵巢癌Skov3细胞的促凋亡作用,其机制可能与上调Bax和caspase-3的基因表达、下调Bcl-2的基因表达有关,可协同CBP诱导细胞凋亡.
