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CCL20抗体对慢性阻塞性肺疾病大鼠外周血和肺泡灌洗液中树突状细胞表面因子表达的影响
目的:研究CC亚族趋化因子配体20(CCL20)和树突状细胞(DCs)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病过程中的作用及抗CCL20抗体治疗对COPD外周血和肺泡灌洗液(BALF)中DCs表面因子表达的影响.方法:选取雄性SPF级Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组、COPD模型组和CCL20抑制组,每组16只.用烟熏及气道内滴注脂多糖(LPS)方法制备COPD大鼠模型.HE染色观察3组大鼠肺组织病理学改变.采用酶联免疫法(ELISA)检测3组大鼠BALF及外周血中CCL20的含量,流式细胞术(FCM)检测3组大鼠外周血和BALF中DCs各细胞因子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ和OX-62)的百分比.结果:COPD组和CCL20抑制组大鼠肺组织HE染色均显示气道炎症和肺气肿表现,但后者气道炎症和肺气肿表现较前者减轻.与正常对照组比较,COPD组和CCL20抑制组大鼠外周血及BALF中CCL20含量增加(P＜0.05)；与COPD组比较,CCL20抑制组大鼠外周血中CCL20含量未见改变,但BALF中CCL20含量降低(P＜0.05).与正常对照组比较,COPD组大鼠外周血中CD80、CD86和OX-62百分比均升高(P＜0.05)；与COPD组比较,CCL20抑制组大鼠外周血中CD86和OX-62百分比均降低(P＜0.05).与正常对照组比较,COPD组及CCL20抑制组大鼠BALF中CD80和CD86百分比均升高(P＜0.05)；与COPD组比较,CCL20抑制组大鼠BALF中CD80百分比降低(P＜0.05).结论:CCL20参与了COPD的发病过程,CCL20抗体对该过程有一定的抑制作用.CCL20抗体可以减轻DCs在外周血中的增加和气道内的募集,从而延缓气道炎症或肺气肿的产生.
关键词： 慢性阻塞性肺疾病 树突状细胞 趋化因子 CC亚族趋化因子配体20 -
人CCL20基因打靶载体的构建与鉴定
目的:构建针对人CC亚族趋化因子配体20(CC chemokine ligand 20,CCL20)基因外显子2的置换型打靶栽体.方法:设计和合成引物,利用长距离聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)从永生化人角质形成细胞系(HaCaT)基因组DNA中克隆出CCL20基因组DNA片段,再以CCL20基因为模板扩增出长度为1969 bp的同源短臂和2356 bp的同源长臂.分别插入pioxP栽体的Neo基因上游和下游,构建针对人CCL20基因外显子2的置换型打靶载体(ploxP-hCCL20).将打靶载体线性化并以电穿孔方法转移入HaCaT,观察克隆的形成.结果:经过PCR、限制性内切酶鉴定及DNA序列测定.证实该载体的两条同源臂包含人CCL20基因的外显子1、3、4及其邻近的部分内含子.结论:ploxP-hCCL20载体构建成功,增加Neo基因下游同源臂长度的策略有可能提高细胞基因敲除的同源重组率.
关键词： 人 CC亚族趋化因子配体20 打靶载体 序列分析 -
趋化因子受体CCR6及其配体CCL20的表达与结直肠癌肝转移关系的实验研究
背景与目的:趋化因子受体及其配体在肿瘤特异性转移中发挥重要作用,本研究旨在探讨人趋化因子受体6(human chemokine receptor 6,CCR6)及其配体(CC chemokine ligand 20,CCL20)的表达与结直肠癌肝转移的关系.方法:取液氮保存的50例结直肠癌标本,运用实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测不同组织中CCR6、CCL20 mRNA和蛋白表达情况,分析其差异.结果:CCR6及CCL20 mRNA和蛋白在结直肠癌和肝转移灶中高表达,并且均显著高于癌旁组织.CCR6 mRNA和蛋白在结直肠癌病灶中的表达比在肝转移灶中高.相反,CCL20 mRNA和蛋白在肝转移灶中的表达比在结直肠癌组织中高.结直肠癌组织中CCR6及CCL20 mRNA和蛋白表达与患者的性别、年龄和病理类型无明显关系.结论:CCR6与其配体CCL20特异性结合,可能参与调节介导结直肠癌向肝脏特异性转移过程.
关键词： 趋化因子 人趋化因子受体6 CC亚族趋化因子配体20 结直肠癌 肝转移
