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Disabled-1在人乳腺癌细胞中的表达及其对细胞周期的影响
目的:探讨 Disabled-1(Dab1)基因在乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达情况,并阐明 Dab1对乳腺癌细胞周期的影响。方法:体外培养永生化的乳腺上皮细胞 MCF-10A 及乳腺癌细胞 MCF-7、BT-549和MDA-MB-231,实时荧光定量(Real-time PCR)法检测 MCF-10A、MCF-7、BT-549和 MDA-MB-231细胞中Dab1 mRNA 的表达水平,Western blotting 法检测 Dab1蛋白的表达水平。取对数生长期的 BT-549细胞,分为对照组、转染 pKH3组和转染 pKH3-Dab1组,采用流式细胞术检测各组细胞周期的变化情况。结果:Real-time PCR 法检测,与MCF-10A细胞(0.998±0.020)比较,乳腺癌细胞 MCF-7(0.504±0.037)、BT-549(0.302±0.027)和MDA-MB-231(0.330±0.031)中 Dab1 mRNA 相对表达水平明显下降(P <0.05)。Western blotting法检测,与 MCF-10A 细胞(0.227±0.021)比较,乳腺癌细胞 MCF-7(0.134±0.014)、BT-549(0.076±0.01)和 MDA-MB-231(0.074±0.005)中 Dab1蛋白表达水平明显下调(P <0.05)。流式细胞术检测,与对照组和转染 pKH3组比较,转染 pHK3-Dab1组 BT-549细胞出现细胞周期 G1期阻滞。结论:Dab1在体外培养乳腺癌细胞系中表达下调,Dab1过表达可阻滞乳腺癌细胞 G1细胞周期进展。