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影响美托洛尔治疗效果的药物基因组学研究进展
药物临床反应个体差异与药物基因组学关系密切.研究证明,药物代谢酶、药物受体及其下游蛋白基因的遗传变异是造成药物反应个体差异的主要因素.美托洛尔作为治疗高血压及心血管疾病的经典药物被广泛应用于临床,但其安全范围窄,较易发生药物不良反应.近年研究发现,药物代谢酶CYP2D6、β1肾上腺受体蛋白以及G蛋白基因的遗传多态性是决定美托洛尔疗效个体差异的主要内在因素.本文作者对导致美托洛尔药物反应个体差异的相关基因的多态性及其对美托洛尔疗效的影响进行评述,以期为减少美托洛尔不良反应及提高临床疗效提供参考.
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狂犬病毒G蛋白基因的克隆、表达及生物学活性鉴定
目的:将狂犬病毒G蛋白(rabies virus G protein,RVG)基因片段克隆到原核表达载体中,表达并纯化GST融合G蛋白,为研制狂犬病新型ELISA抗体检测试剂盒提供诊断抗原.方法:根据GenBank发表的狂犬病病毒CVS-11株G蛋白结构基因序列设计引物,利用RT-PCR扩增出RVG基因片段,并定向克隆于pGEX-6P-1载体中,构建原核表达载体pGEX-RVG.阳性重组质粒转化宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,通过对表达条件的优化,确定可溶性表达的佳条件.利用谷胱甘肽转移酶(GST)亲和层析法获得纯化的目的蛋白,Western blot对表达的蛋白进行鉴定.结果:构建了原核表达载体pGEX-RVG,经IPTG诱导后可表达分子量约36 000融合蛋白,经纯化获得高纯度的目的蛋白.Western blot检测表明重组的融合蛋白有较好的生物学活性.结论:成功表达并纯化狂犬病毒G蛋白,为进一步研制狂犬病新型ELISA抗体检测试剂盒提供抗原.