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CCB细胞文献资料
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锦鲤疱疹病毒保存方法的筛选及比较
目的 筛选并比较锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)的保存方法.方法 将患锦鲤疱疹病毒病(Koi herpesvirus disease,KHVD)的患病鱼组织分别采用-80℃超低温保存法、液氮超低温保存法、50％磷酸甘油缓冲液保存法、乙醇保存法及异丙醇保存法保存90 d,进行PCR鉴定,同时检测不同方法保存的患病组织对感染健康鱼及CCB细胞的影响.用KHV感染CCB细胞后,收集病毒液,分别于4、-20、-80℃及液氮中存放90 d,检测病毒感染力(TCID50).结果 5种方法保存的患病鱼组织经PCR检测均为KHV阳性.于50％磷酸甘油缓冲液、乙醇及异丙醇中保存的患病鱼组织失去了感染健康鱼的能力,而于-80℃及液氮中保存的患病鱼组织均可使健康锦鲤感染KHV;仅保存于50％磷酸甘油缓冲液中的患病鱼组织可感染CCB细胞.于4及-20℃保存的CCB细胞病毒液的病毒感染力分别下降61％和50％,而于-80℃及液氮中保存的CCB细胞病毒液的病毒感染力仅下降7％.结论 利用-80℃及液氮超低温保存法可长期保存患病组织病料和细胞病毒液,于50％磷酸甘油缓冲液保存的组织病料有利于进行病毒的细胞分离.
