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P40基因文献资料
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新孢子虫表面抗原P40基因的克隆及原核表达
目的 克隆并原核表达新孢子虫表面抗原P40基因.方法 PCR扩增新孢子虫表面抗原P40基因,克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组原核表达质粒pET-28a-P40,转化入大肠埃希菌Rosseta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.结果 重组原核表达质粒pET-28a-P40经PCR及双酶切鉴定构建正确;表达的重组P40蛋白相对分子质量约为40 000,有效识别鼠抗新孢子虫阳性血清.结论 成功在Rosseta(DE3)中表达了新孢子虫表面抗原P40基因,为新孢子虫病疫苗的研制及血清学检测方法的建立奠定了基础.
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棉铃虫核型多角体病毒p40基因序列分析
克隆了棉铃虫(Helicoverpa armigera)单粒包埋型核型多角体病毒(HaSNPV)基因组Hind Ⅲ-H、J片段,其长度分别为10 kb和6.7kb.通过对克隆片段末端测序,得到HaSNPV p40基因全序列.p40基因编码区全长966bp,预计可编码36.kD的多肽.HaSNPV p40基因核苷酸序列与HzSNPV p40基因有98%的相同性.这两种基因与BmNPV p40(GenBank-L33180)和AcMNPV gp41(GenBank-L22858)的氨基酸序列相似性43%左右,但四种蛋白对应于HzSNPV p40、HaSNPV p40的28～277氨基酸区域,同源性高达62%,并且存在一个保守的亲水性结构域.进一步将在基因组中相邻的HindⅢ-H、J两片段用BamH Ⅰ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ、PstⅠ四种限制性内切酶进行了分析.
关键词： 棉铃虫核型多角体病毒 P40基因 序列 限制性内切酶图谱
