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基因沉默效应文献资料
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一种siRNA药物载体薄膜的稳定性与基因沉默效应评价
目的 分析一种siRNA药物载体薄膜在溶液中的稳定性,并评价其基因沉默效应.方法 利用层层自组装(layer-by-layer self-assembly,LBL)技术制备壳聚糖(chitosan,CHS)-透明质酸(hyaluronic acid,HA)-siRNA多层薄膜.通过UV-vis吸光度法对siRNA在薄膜上的生长过程以及在不同缓释液中的稳定性分别进行验证.结合荧光图像和流式细胞术,采用直接与细胞接触的方式检测该siRNA载体薄膜的HEK293T细胞转染效应.结果 CHS-HA-siRNA多层薄膜在260 nm处有很强的吸收峰,且随着含siRNA的组装层数的增加,在260 nm的吸光度值越大.该siRNA载体薄膜在1 mol/L NaC1溶液中释放效果好,在pH7.4的PBS缓冲液中次之,在纯水中稳定性好.过低或过高的盐离子浓度对促进薄膜的崩解无优势.阳性对照组7-eGFP-siRNA和2-eGFP-siRNA具有较好的沉默绿色荧光蛋白基因的效应;在细胞培养2d后的转染试验中,阳性对照组7-eGFP-siRNA较2-eGFP-siRNA组显示出更强的基因沉默效应.结论 成功构建了一种非病毒siRNA递送载体系统,为未来实现siRNA局部给药开辟了一条可行的途径.
