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重组戊型肝炎p179疫苗小鼠抗体间接ELISA检测方法的建立及其初步应用
目的 建立重组戊型肝炎p179疫苗抗体间接ELISA检测方法,并进行初步应用.方法 确定重组戊型肝炎疫苗p179抗原的佳包被浓度及包被条件、酶标抗体的佳稀释度、封闭条件、佳抗体稀释液,对建立的方法的特异性、准确性及精密度进行验证,并与市售ELISA试剂盒进行比较.结果 抗原佳包被浓度为1μg/ml,4℃包被过夜;酶标抗体佳稀释度为1∶5000;3％牛血清白蛋白封闭3h;佳抗体稀释液为含1％酪蛋白PBS.建立的方法检测的A450与重组戊肝抗原浓度呈明显的剂量依赖性,对不相关的anti-HAV、anti-HB、anti-INF、anti-RABV无交叉反应;36份小鼠阳性血清的检出率为100％;3份阳性血清重复检测20次的CV均小于15％.市售某厂家ELISA试剂盒检测48份血清,阳性检出率为83.3％,建立的间接ELISA方法检测,阳性检出率为89.6％.结论 建立了重组戊肝p179疫苗抗体间接ELISA检测方法,可用于重组戊肝疫苗小鼠免疫后血清抗体的检测.
关键词： 戊型肝炎疫苗 p179 小鼠 间接酶联免疫吸附试验
