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  • 羊布鲁菌O链M抗原提纯及其单克隆抗体的研制

    作者:梅建军;王兴龙;万忠海;李晓燕;马云志;张辉;崔丽瑾

    目的 研制羊布鲁菌O链M纯化抗原及其单克隆抗体.方法 采用冷酚法提纯羊布鲁菌16M的O链抗原,并经琼脂糖凝胶免疫扩散和SDS-PAGE鉴定,用灭活的该抗原免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并进行鉴定.结果 建立3株分泌单克隆抗体的细胞株2D10、3C6和1E10,ELISA效价分别为1.380、1.109和1.048,与大肠杆菌O:157、小肠结肠炎耶尔森菌O:9、鼠伤寒沙门菌和猪胸膜肺炎放线杆菌均无交叉反应.3C6和1E10与牛布鲁菌544A发生交叉反应,2D10的亲和常数达5.30×107 M-1.结论 已制备出纯化的羊布鲁菌O链M抗原及其单抗.

  • 羊布鲁菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证

    作者:梅建军;王兴龙;李晓燕;刘锴;任林柱;贾剑锋;张琴

    目的 建立羊布鲁菌双抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证.方法 应用针对羊布鲁菌O链M抗原的种特异性单克隆抗体,建立检测羊布鲁菌抗原的双抗体夹心ELISA方法,并进行重复性、特异性、敏感性验证及初步应用.结果 经验证,该方法重复性好,特异性强,低检出限为3.0×103 CFU/ml,与平板凝集试验的符合率为100%.结论 已建立了特异、敏感的检测羊布鲁菌的双抗体夹心ELISA方法.

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