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基因编辑技术的研究进展
随着对基因功能研究的不断深入,基因修饰技术逐渐成为基因功能研究的主要方法.基因修饰技术根据不同原理及发展阶段可分为同源重组、RNA干扰和基因编辑.其中基因编辑技术以其能够定点切割DNA,构建简单、特异性高并且适用于各类动植物等特点,近年来引起了科学界的广泛关注.本文就基因定点编辑技术研究的相关进展进行简要综述.
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CRISPR/Cas9技术及其在药物研发中的应用
CRISPR/Cas是新近在细菌及古细菌中发现的一种可以降解外源核酸的获得性免疫调节系统,它由成簇规律间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)和蛋白质Cas组成,其中Ⅱ型CRISPR/Cas9系统成分简单,包括:crRNA(CRISPR RNA)、tracrRNA(trans-activating crRNA)、Cas9(CRISPR-associated protein),tracrRNA通过RNaseⅢ功能促进crRNA的成熟,由crRNA通过碱基配对识别并向导Cas9结合靶标DNA,后Cas9蛋白通过自身内切核酸酶的活性剪切DNA,达到定点编辑DNA的作用.该技术已被广泛应用于多项科研领域,仿效CRISPR/Cas9作用机理,人工构建融合了tracrRNA和crRNA序列的一种特殊小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)与Cas9的复合体,即能实现定点编辑基因的效果,且操作简捷、高效.文章综述了CRISPR/Cas9技术在药物研发中的应用,如细胞株改造、基因修复、动物模型构建、药物靶点筛选、遗传疾病治疗等.
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浅谈CRISPR CAS/9基因编辑技术
近几年发展起来的CRISPR/Cas9由一种由导向RNA介导的基因组定向编辑技术,由规律成簇间隔短回文重复序列CRISPR以及CRISPR相关蛋白9(Cas9)组成,已成功被改造为第3代人工核酸内切酶.该技术具有突变效率高、构建方法简单快捷,低成本、适用范围广等许多优点,目前已成功应用于细菌、人类细胞、斑马鱼.小鼠、猪、食蟹猴以及多种植物的基因组精确修饰,是一种具有广阔应用前景的基因组定点改造分子工具.
关键词： 基因编辑 CRISPR/Cas9 人工核酸内切酶
