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TACI-Fc-Myc融合蛋白文献资料
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sTACI-Fc-Myc重组质粒的构建、原核表达及活性鉴定
目的:构建sTACI-Fc-Myc重组质粒,并进行原核表达和纯化具有生物活性的融合蛋白.方法:通过PCR法获得sTACI-Fc-Myc重组片段,然后把融合基因片段与原核载体pET28a连接在一起,并构建pET28a-sTACI-Fc-Myc重组子,并转入BL21(DE.3)中进行表达,用蛋白A凝胶亲和层析柱进行纯化及酶联免疫吸附剂(ELISA)法测定其生物学活性.结果:获得了sTACI-Fc-Myc重组质粒,且该质粒可以在BL21(DE3)中表达,亲和层析柱纯化后纯度可达到95％以上,与BAFF的结合活性具有剂量依赖性,浓度达到5 ng/μL时,两者的吸附达到饱和.结论:成功构建了sTACI-Fc-Myc原核表达载体,并使有生物学活性的融合蛋白在BL21(DE3)上获得了稳定表达,为进一步研究并筛选高活性BAFF拮抗肽奠定了基础.
关键词： B细胞活化因子 TACI-Fc-Myc融合蛋白 原核表达
