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SEPHS1文献资料
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miR-129通过靶向SEPHS1对骨肉瘤细胞MG-63增殖及凋亡的影响
目的 探讨miR-129对骨肉瘤细胞系MG-63细胞活性及凋亡的影响.方法 收集30例骨肉瘤组织及其配对的癌旁组织,应用实时荧光定量法(RT-PCR)检测miR-129 miRNA和SEPHS1的mRNA的表达水平,应用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测SEPHS1蛋白的表达水平.在体外培养的MG-63细胞中过表达或敲低miR-129,通过CCK-8检测细胞增殖情况,检测miR-129对MG-63细胞增殖能力的影响.同时应用Western blot和Hoechest染色检测MG-63的凋亡情况.结果 在本研究中,我们发现miR-129在骨肉瘤组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.05).通过建立miR-129过表达或敲低的体外模型,确定miR-129模拟物和抑制物浓度为50 nM和200 nM时过表达和敲低的效果佳.通过软件预测miR-129和SEPHS1具有结合的可能,荧光素酶报告基因试验进一步确定了miR-129和SEPHS1的结合关系.通过Western blot和Hoechest试验,发现敲低miR-129可以显著抑制MG-63的活性,加速MG-63的凋亡.结论 miR-129可能通过与SEPHS1结合,在调节骨肉瘤细胞增殖和凋亡进程中起关键作用.
