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SELDI-TOF-MS技术结合LCM技术分析结肠癌细胞蛋白质组学构成
目的表面增强激光解吸电离质谱(SELDI-TOF-MS)技术结合激光捕获微切割(LCM)分析正常结肠粘膜上皮细胞和结肠癌细胞的蛋白质组学构成.方法将新鲜结肠标本常规制备冰冻组织切片,通过激光捕获微切割从组织冰冻切片中分别切取结肠粘膜上皮细胞和结肠癌细胞,SELDI技术分析蛋白质组学构成.结果激光捕获微切割可正确有效地分离结肠癌和正常粘膜上皮细胞;比较结肠癌和正常结肠粘膜细胞的飞行质谱图提示有多处峰存在显著性差异.结论 SELDI技术结合激光捕获微切割技术可以快速有效分析结肠癌细胞的蛋白质构成;所获结果为结肠癌发生发展过程细胞蛋白质文库的建立提供了依据.
关键词： 基质辅助激光解吸时间飞行质谱 激光捕获微切割 结肠癌 蛋白质组 -
激光捕获微切割技术在感染性皮肤病分子病理诊断机制研究中的应用
激光微切割技术可在背景复杂的固体组织切片中获得完整的特异性细胞群甚至单个细胞,联合分子生物学技术,可对目的细胞的DNA、RNA和蛋白质进行分析,提升了分子病理学诊断机制研究的水平.结合下游的PCR等分子技术,激光微切割技术应用于感染性皮肤病标本,可分析浸润的淋巴细胞克隆群,探讨感染的发病机制,同时能检测病灶中的单纯疱疹病毒、水痘带状疱疹病毒,结核杆菌等皮肤组织感染常见的病原微生物.
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激光捕获微切割技术在肿瘤基础研究中的应用进展
显微切割(microdissection)是20世纪90年代出现的新技术,该技术先后经历了3个发展阶段:①通过机械手段去除非目的组织,间接获得目的细胞.这项技术较为繁琐;②采用机械分离的办法[1],直接切割获得目的细胞或细胞群,该技术不仅对人员、设备要求高,而且费时、结果不稳定.③激光的运用.早期的激光微光束显微切割技术(laser microbeam microdissection,LMM)[2,3]利用脉冲紫外激光束去除目的细胞周边的组织,间接获取细胞.20世纪90年代中后期,美国国立卫生院国家肿瘤研究所开发了激光捕获微切割技术(laser capture microdissection,LCM)[4],它可以快速、准确得直接获得纯净的细胞亚群、甚至单个细胞,是1项先进、实用的技术.
