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线粒体DNA缺失作为辐射生物分子剂量计的研究现状
辐射生物剂量计,在估算个体受照剂量中起着十分重要的作用.近年来,线粒体DNA片段缺失作为一种新的辐射生物分子剂量计的可行性研究,受到越来越多的关注.本文对线粒体DNA片段缺失尤其是线粒体4977bp缺失的研究现状作一简要概述.
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PUVA治疗诱导皮肤线粒体DNA 4977 bp缺失突变累积的研究
为探讨线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)4977bp缺失突变与皮肤光老化之间的关系,采用三条引物PCR的方法检测长波紫外线光化学疗法(PUVA)治疗的银屑病患者背部非皮损区皮肤mtDNA 4977bp缺失突变的累积.结果发现,在PUVA治疗期间3～21天、治疗后1～6个月和治疗后6个月以上的各组活检标本中,发生4977bp缺失突变的mtDNA占总mtDNA比例分别为0.06,0.12和0.19,和未经PUVA治疗的对照组比较均有显著性差异(P<0.01).表明线粒体DNA 4977bp缺失突变累积与皮肤光老化密切相关,可能作为衡量皮肤紫外线损伤程度的分子生物学标志.
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健康人周围全血线粒体DNA 4 977 bp缺失的实时定量聚合酶链反应检测
目的 了解健康人周围全血线粒体DNA(mtDNA)4 977 bp缺失(△mtDNA4977)情况.方法 采集60名年龄20～80岁的健康人周围血,用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法 检测△mtDNA4977和总mtDNA(mtDNAtotal)的量并进行分析.结果 在60名健康人周围血样品中,△mtDNA4977研的检出率为45%(27/60),△mtDNA4977率在0%～3.076×10-5%,年龄和性别不影响△mtDNA4977水平(P>0.05).结论 在健康人周围血中,△mtDNA4977水平较低,且未显示出年龄依赖性累积现象.
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人卵母细胞和胚胎线粒体DNA缺失的研究
目的:检测人类卵子和胚胎线粒体DNA(mtDNA)4977bp缺失,并探讨这种缺失存在的病理生理学意义.方法:收集不受精的成熟卵母细胞和不适合移植及冷冻保存的胚胎;碱裂解法制备单个细胞DNA;单细胞巢式PCR检测人卵母细胞和胚胎mtDNA 4 977 bp缺失情况.结果:122个卵母细胞中,56个(45.9%)发现有4 977 bp缺失;90个胚胎中,21个(23.3%)发现有缺失,二者间差异有显著性意义.将卵母细胞和胚胎分别按患者的年龄分为＜30岁组、30-34岁组和＞34岁组,卵母细胞缺失率分别为:43.6%、44.4%和51.7%,各组间差异无显著性意义:各组胚胎的缺失率分别为21.4%、20.0%和29.6%,差异亦无显著性意义.将卵母细胞和胚胎分别按患者是否妊娠分组,结果发现妊娠组与非妊娠组间mtDNA缺失率的差异也无显著性意义.结论:mtDNA 4 977 bp缺失与受精失败有关,其是否参与卵子老化及其机制有待进一步研究.
