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柱前衍生反相高效液相色谱法测定西洋参中游离氨基酸
目的:建立了一种利用反相高效液相色谱同时测定西洋参中17种游离氨基酸的分析方法.方法:以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,用Venusil-AA氨基酸分析专用柱(5μm,4.6 mm×250 mm),醋酸钠缓冲溶液(pH6.5)-乙腈溶液和80%乙腈水溶液为流动相,采用梯度洗脱,紫外检测器在254 nm波长处检测.结果:氨基酸浓度在0.5～0.012 5 μmol范围内,线性相关系数均大于0.99.17种氨基酸的平均回收率在96.5%～102.3%.结论:西洋参根中的游离氨基酸主要以精氨酸为主,占游离氨基酸总量50%以上,这一结果为进一步研究西洋参的化学成分和药理作用提供了前提条件.
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异硫氰酸苯酯柱前衍生化RP-HPLC法测定人血浆中10种氨基酸的浓度
目的:建立一种异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相色谱同时测定人血浆中10种氨基酸的方法.方法:以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,Venusil-AA柱为分析柱,柱温40℃,采用二元梯度洗脱,254 nm波长处检测.结果:氨基酸血浆浓度在15.6～250 μmol/L时,其峰面积与内标物峰面积的比值和氨基酸血浆浓度的线性相关系数,均大于0.99;10种氨基酸的加样回收率在96.3%～103.4%;日间和日内变异系数均在4.8%以下.应用该方法对小儿血浆中氨基酸含量进行了测定,取得了满意的结果.结论:该法简便、稳定,并且分离效果好,可用于人血浆中氨基酸浓度的检测.
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反相高效液相色谱法测定食品中γ-氨基丁酸的研究
目的:建立反相-HPLC法测定食品中γ-氨基丁酸(GABA)的测定方法.方法:用正亮氨酸作为内标物,样品中的γ-氨基丁酸和正亮氨酸与2,4二硝基氟苯(FDNB)反应转化成稳定的衍生物并用乙醚萃取,挥发后,残余物溶解在NaOH溶液中,处理液注入反相-HPLC中,用甲醇溶液在盐酸缓冲液中线性梯度洗脱,于400 nn处检测.结果:GABA,正亮氨酸分别和FDNB反应60 min后达到平衡,流出液检测峰位分别在45 min和60 min,GABA在1ng/ml～100 ng/ml范围内具有良好的线性,其相关系数大于0.999,检出限为1 ng/ml,实际样品加标回收率为98.4±2.3%.结论:此方法简单、准确,用于实际样品检测,结果满意.
