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淫羊藿苷介导MAPK信号通路促进间充质干细胞株C3H10T1/2成骨分化的体外研究
目的:探索补肾中药淫羊藿有效成分淫羊藿苷对间充质干细胞株C3H10T1/2的促成骨分化作用,及该作用与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的相关性.方法:体外培养间充质干细胞株C3H10T1/2,给予淫羊藿苷(0、10-7、10-6、10-5和10-4 mol/L)联合成骨诱导液干预26 d后,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色观察成骨分化情况.10-5 mol/L淫羊藿苷干预C3H10T1/2细胞2、8、24与48 h后,实时荧光定量聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction,PCR)检测p38、细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,p42/44) mRNA的表达.10-5 mol/L淫羊藿苷干预C3H10T1/2细胞10、30、60和120 min后,蛋白质印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogenactivated protein kinase,p38)、p42和p44,以及翼式转录因子氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)及其磷酸化产物的蛋白表达情况.结果:10-5 mol/L淫羊藿苷联合成骨诱导液的促进C3H10T1/2细胞成骨分化能力强.PCR结果显示,淫羊藿苷作用2h后p38基因表达显著下调(P＜0.01)；p42和p44 mRNA水平在淫羊藿苷干预2h后均显著下调(P＜0.01),而在淫羊藿苷干预48 h后表达均上调(P＜0.05,P＜0.01)；其他时间点各通路基因表达情况均无显著变化(P＞0.05).10-5 mol/L淫羊藿苷作用10 min后,磷酸化p42/44蛋白表达减弱,磷酸化p38蛋白表达增强,并持续到30 min,但对JNK蛋白的表达无明显影响.结论:淫羊藿苷促进间充质干细胞株C3H10T1/2向成骨细胞分化,其作用可能与激活p38和抑制ERK蛋白的表达有关.
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CD147、MMP-9和P-ERK在乳腺癌中的表达及临床意义
目的 研究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子CD147、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)在乳腺癌组织中的表达及意义.方法 应用免疫组化EnvisionTM二步法检测96例乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)、34例导管内癌(ductal carcinoma in situ,DCIS)及10例乳腺腺病中CD147、MMP-9及p-ERK蛋白的表达,并分析其与临床病理参数的相关性.结果 CD147、MMP-9和p-ERK在IDC中阳性表达率分别为59.4%、54.2%和52.1%,而DCIS的表达阳性率则分别为35.3%、32.6%和29.4%,两组差异具有显著性(P＜0.05).乳腺腺病均表达阴性.CD147和MMP-9表达与IDC的肿块大小(r=0.336;0.306,P＜0.05)、TNM分期(r=0.384;0.308,P＜0.01)、组织学分级(r=0.272;0.323,P＜0.05)、淋巴结转移(r=0.276;0.251,P＜0.05)和术后5年生存率(r=0.225;0.251,P＜0.05)均呈正相关.CD147与MMP-9蛋白的表达与患者年龄无关.p-ERK蛋白则与IDC的组织学分级(r=0.301,P＜0.05)相关,与其它指标均无关.Spearman相关分析,显示在乳腺IDC中CD147与MMP-9的表达呈正相关(r=0.261,P＜0.05),p-ERK与CD147和MMP-9蛋白的表达均无相关性(r=0.013;0.122,P＞0.05).结论 CD147及MMP-9在乳腺IDC中表达显著增高并呈正相关性,在乳腺癌的侵袭及转移过程中可能起重要作用.CD147诱导和刺激MMP-9蛋白表达可能与MAPK途径有关.
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ERK 蛋白磷酸化和肌成束蛋白 Fascin-1与大肠癌侵袭转移关系探讨
目的：探讨大肠癌组织中ERK 磷酸化（p‐ERK ）和Fascin‐1阳性表达情况，及其两者之间的相关性，评估其在大肠癌侵袭转移中的作用。方法：大肠癌患者标本86例及癌旁正常大肠黏膜组织40例，通过免疫组织化学方法检测其p‐ERK和Fascin‐1蛋白的表达，分析其表达与临床病理特征之间的关系，及其两者表达间的相关性。结果：p‐ERK 和Fascin‐1在大肠癌中的表达高于正常大肠黏膜（P＜0．01），大肠癌中p‐ERK表达与肿瘤是否侵袭浆膜、是否发生淋巴结转移（P＜0．01）以及肿瘤的分期相关（ P＜0．05），Fascin‐1阳性表达与肿瘤是否侵袭浆膜，是否发生淋巴结转移及远处转移以及肿瘤的分期相关（ P＜0．01）。在大肠癌中的ERK的磷酸化状态与Fascin‐1阳性表达有相关性，ERK高磷酸化组的Fascin‐1阳性表达率高于ERK低磷酸化组（P＜0．01）。结论：在大肠癌中ERK的磷酸化和Fascin‐1蛋白表达存在相关性，且都与肿瘤的侵袭转移密切相关。
关键词： 结肠肿瘤 肿瘤转移 细胞外信号调节MAP激酶 fascin
