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阻断经典Wnt通路对棕色脂肪干细胞向起搏样细胞分化的作用
目的:研究阻断经典Wnt通路对棕色脂肪干细胞向起搏样细胞分化的影响.方法:在诱导棕色脂肪干细胞向起搏特性诱导的过程中,培养基中加入经典Wnt通路阻断剂Dkk-1培养10 d.相差显微镜观察诱导组细胞的形态学变化、应用real-time PCR检测其中起搏细胞发育相关结构基因的表达情况,免疫荧光显色普通光镜和激光共聚焦显微镜观察起搏特征分子的蛋白表达.结果:分化后的棕色脂肪干细胞具有起搏细胞特性,经Dkk-1诱导后,棕色脂肪干细胞向起搏样细胞的转化率明显提高,起搏细胞发育相关基因和蛋白表达明显上调.结论:阻断经典Wnt通路可促进棕色脂肪干细胞向起搏样细胞的分化.
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大鼠棕色和白色脂肪干细胞体外成脂能力的比较
目的:比较棕色脂肪干细胞(brown adipose stem cells,BADSCs)和白色脂肪干细胞(white adipose stem cells,WADSCs)的体外成脂能力.方法:分离SD大鼠脂肪组织,获得BADSCs和WADSCs.显微镜观察细胞形态、流式鉴定细胞表面抗原标记物,并成脂诱导两种细胞.诱导后油红0染色显示形成的脂滴.RT-PCR检测成脂相关基因的表达.结果:BADSCs和WADSCs都具有成脂分化能力;与BADSCs相比,WADSCs脂滴形成相对较快且数量较多,RT-PCR结果显示PPAR、C/EBPβ成脂标志基因表达也相对较高.结论:BADSCs和WADSCs都具有成脂分化能力.相比较而言,WADSCs有较强的成脂分化能力.