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大鼠海马γ-氨基丁酸-A受体在生后发育中的表达
目的:研究大鼠生后发育过程中海马组织γ-氨基丁酸-A(GABA-A)受体的表达规律.方法:用免疫组织化学和PCR技术,检测不同年龄大鼠海马组织GABA-A受体及编码该受体的mRNA表达,并用图像分析方法进行定量研究.结果:大鼠海马组织在生后3 d已经出现GABA-A受体免疫反应,以后逐渐增强,到生后30 d达到高值,海马各区GABA-A受体免疫反直强度没有显著的差别;编码GABA-A受体的mRNA表达电有类似的增龄性增多,但其表达高峰值提前到14 d.结论:生后大鼠海马GABA-A受体表达在一定时期内呈增龄性表达增强的趋势.
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γ-氨基丁酸及其受体调控CD8+T细胞活化
目的 探讨γ-氨基丁酸(GABA)及受体对CD8+T细胞增殖能力的影响.方法 采用CD8+T细胞磁珠分选试剂盒分选Balb/c小鼠脾脏的CD8+T细胞;在CD3/CD28活化磁珠的作用下,以不同浓度的GABA刺激CD8+T细胞,通过5-溴脱氧尿苷(BrdU)标记和流式细胞术检测CD8+T细胞的增殖情况;通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)比较CD8+T细胞活化前后GABA-A、GABA-B受体的表达.结果 流式检测结果显示,GABA可抑制已活化的CD8+T细胞的增殖,表现为CD 152+CD8+T细胞明显减少;实时荧光定量PCR结果显示,仅在CD8+T细胞活化时表达的GABA-A受体亚型为α2、α6和GABA-B受体亚型为1a;CD8+T细胞活化后有明显增加的GABA-A受体亚型有α3、α5、β2、β3、γ1、γ2和θ,而GABA-B2R和GABA-B1b则在活化前和活化后均无表达.结论 GABA可抑制已活化的CD8+T细胞的增殖,其活化受GABA相关受体所调节,但其具体机制还有待于进一步探讨.
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琥珀酸对大鼠化学性点燃和杏仁核电刺激性点燃的抑制作用
目的:研究琥珀酸对大鼠戊四唑化学性点燃kindllng)发作及杏仁核电刺激点燃发作的影响及作用机制.方法:建立大鼠戊四唑化学性点燃模型和杏仁核电刺激点燃癫痫模型,测定琥珀酸对点燃发作的脑电活动及行为变化指标的影响.测定琥珀酸对GABAA受体拮抗剂印防己毒素诱发小鼠惊厥的影响.结果:琥珀酸(100-400 mg/kg,ip)对两种点燃模型有显著抑制作用,降低发作强度和全身性发作百分率(P<0.05,P<0.01,可升高杏仁核电刺激点燃大鼠的局灶性后放电阈值(p<0.05,P<0.01),以上反应呈剂量效应关系.琥珀酸可延长印防己毒素诱发小鼠惊厥的潜伏期(p<0.05,p<0.01.结论:琥珀酸对大鼠戊四唑化学性点燃和脑杏仁核电刺激点燃发作有抑制作用,其机制可能与增强GABAA受体功能有关.
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重组人的GABA-A受体复合物α5(155氨酸突变为缬氨酸)β3γ2s的药理学特征
目的：为了研究重组人的GABA-A受体复合物α5β3γ2s的药理学特征，阐明哪一个氨基酸是影响亲合性的关键。方法：通过定位导向突变，我们构建了α5(155亮氨酸突变为缬氨酸)亚基，并通过bac-ulovirus病毒-Sf-9昆虫表达系统重组了α5(155亮氨酸突变为缬氨酸)β3γ2s亚基的GABA-A受体复合物，测定了15个GABA-A受体GABA位点活性化合物。结果：发现竞争性拮抗剂SR95531和抑制剂Thio-4-piol的IC 50值增加了约3倍。结论：155位氨基酸很有可能是影响SR95531和Thio-4-piol对含有α5亚基的GABA-A受体复合物亲和性和药效的重要位点。
