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  • 高迁移率族蛋白B1基因的克隆及其与神经管发育的相关关系

    作者:于丽;管英俊;高英茂;孙秀宁

    目的:构建神经管cDNA文库,寻找神经管发育相关基因.方法:提取E8.5 d金黄地鼠神经管总RNA;SMART技术构建神经管eDNA噬菌体表达文库;重组噬菌体PCR鉴定.将出现频率很高的重组噬菌斑,经质粒转化、酶切鉴定和DNA序列分析,证实为高迁移率族蛋白B1基因(HMGB1).将HMGB1 cDNA片段回收、纯化,制备探针;Northern杂交检测不同发育阶段神经管中HMGB1 mRNA的表达变化.结果:构建的HMGB1cDNA片段含有完整的cDNA序列.Northern杂交显示:随胚胎发育,神经管HMGB1 mRNA表达量逐渐增加,E10 d增加为明显,E12 d仍处于较高水平;而8.5 d高温致畸胚神经管,HMGB1 mRNA表达量较对照组明显减少.结论:HMGB1基因的表达与神经管发育及高温致神经管畸形的发生密切相关.

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