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重组CCL2小鼠黑色素瘤B-16细胞的建立及生物学活性的鉴定
目的:在小鼠黑色素瘤B-16细胞中克隆表达趋化因子CCL2,以进一步研究趋化因子与肿瘤的关系.方法:从小鼠腹腔巨噬细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增CCL2 cDNA,将此片段重组于真核表达载体pcDNA3.0,脂质体FuGENE6转染鼠黑色素瘤B-16细胞,G-418筛选阳性克隆.结果:RT-PCR和免疫细胞化学鉴定转染B-16细胞中有较强CCL2的表达,体外趋化实验表明重组CCL2有生物学活性.结论:获得有趋化活性的重组CCL2的小鼠黑色素瘤B-16细胞.
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几种美白活性物质对酪氨酸酶活性的体外抑制作用及细胞毒性
目的比较熊果苷、VitC、VitC衍生物、氢醌和曲酸对小鼠恶性黑色素瘤细胞(B-16细胞)中的酪氨酸酶活性及酪氨酸酶对照品的抑制情况,并检测它们对细胞的毒性,以期为皮肤美白剂的开发提供有价值的参考.方法采用左旋多巴氧化法测定酪氨酸酶的活性,测定细胞上清液中乳酸脱氢酶的含量.结果细胞中酪氨酸酶的活性与药物浓度和药物作用时间成反比,有量效关系.结论在5种美白剂中,熊果苷为安全有效.
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湘西龙山百合对小鼠B-16黑色素瘤细胞黑色素含量、酪氨酸酶活性的影响
目的 观察不同浓度湘西龙山百合提取液对小鼠B-16细胞细胞活力、黑色素含量、酪氨酸酶活性的影响.方法 选用同一传代小鼠B-16黑色素瘤细胞并分组,分别加入不同浓度百合提取液、维生素C二种溶液作用3d后,用MTT法测定B-16细胞活力;用Maeda等的方法测定B-16细胞酪氨酸酶活性;用Victoria等的方法测定B-16细胞黑色素含量.结果 湘西龙山百合提取液对小鼠B-16细胞的酪氨酸酶活性、黑色素合成的抑制作用明显强于维生素C,组间差异有统计学意义(P＜0.05),且其抑制作用随浓度的增加而增加;同时湘西龙山百合提取液其细胞毒性作用同样强于维生素C,组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 百合提取液对B-16细胞的生长、酪氨酸酶活性和黑色素合成的抑制作用强于维生素C,其抑制作用与浓度呈正相关.
