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TLR2-MyD88通路在B细胞交叉提呈肿瘤来源自噬小体抗原过程中作用的初步研究
为研究B细胞表面TLR2在B细胞交叉提呈肿瘤来源自噬小体(tumor derived-autophagosome,DR)抗原诱导效应T细胞再活化过程中的作用,DR经淋巴结注射方式免疫C57BL/6小鼠,收获免疫小鼠的淋巴结细胞作为效应T细胞;以负载DR的C57BL/6、TLR2-/-和MyD88-/-及TLR2抗体封闭的小鼠脾脏B细胞作为pAPC.DR分别与分离纯化的WTC57BL/6、TLR2-/-/和MyD88-/-及TLR2抗体封闭后的小鼠B细胞共孵育,然后与免疫小鼠CD4+T和CD8+T细胞共孵育,流式细胞术及ELISA法检测IFN-γ的分泌水平.结果显示,与WT C57BL/6小鼠B细胞组相比,负载DR的TLR2-/-B细胞和MyD88-/-B细胞及TLR2抗体封闭的B细胞活化效应CD8+T和CD4+T细胞产生的IFN-γ水平显著降低.以上结果提示B细胞交叉提呈DR抗原、诱导效应T细胞活化依赖于TLR2/MyD88信号通路.
关键词： B细胞 肿瘤来源自噬小体 TLR2-MyD88 抗原提呈 -
B细胞表面TLR2受体在肿瘤来源自噬小体活化B细胞过程中的作用
目的 研究B细胞表面TLR2受体在肿瘤来源自噬小体活化B细胞过程中的作用.方法 抗CD43磁珠分选法分离小鼠脾脏B细胞,用不同质量浓度TLR2抗体(0、3、10、30 μg/ml)与B细胞共孵育,再用肿瘤来源自噬小体(DRs)刺激B细胞72 h,流式细胞术检测B细胞表面MHCⅡ类分子及共刺激分子CD86的表达情况;第3天收取上清ELISA检测细胞培养上清中IL-6和IL-10的表达;第7天收取上清液,ELISA检测细胞培养上清液中IgM的表达.结果 与未预处理的B细胞组相比,DRs活化TLR2抗体封闭的B细胞组上调B细胞表面MHCⅡ类分子和CD86表达的作用明显降低;DRs刺激TLR2抗体封闭B细胞组分泌IL-6和IL-10的水平显著降低;DRs刺激TLR2抗体封闭的B细胞产生IgM水平显著低于未预处理的B细胞组.结论 B细胞的TLR2受体在DRs诱导B细胞活化、分泌细胞因子及产生IgM过程中发挥了重要作用.
