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脂联素影响体外培养肝细胞乙醛氧化酶1表达的研究
目的 研究脂联素( APN)对饱和脂肪酸(SFA)孵育HepG2细胞及HL-7701肝细胞乙醛氧化酶1( AOX1)分泌的影响,探讨APN对非酒精性脂肪肝脏病变(NAFLD)的治疗效果及机制.方法 用100 μmno/LSFA孵育细胞得到脂肪性HepG2细胞及HL-7701细胞,同时设立细胞对照组(未经100μmol/L SFA孵育).然后采用不同浓度APN(0.5、1.0、1.5、2.5μg/mL)孵育脂肪性HepG2细胞及HL-7701细胞,将未经APN孵育的细胞作为对照.运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测2种细胞AOX1基因表达,运用免疫印迹法检测2种细胞AOX1蛋白表达.结果 与未经100 μmol/L SFA孵育的对照组比较,经100 μmol/L SFA孵育过的HepG2细胞及HL-7701细胞的AOX1基因及蛋白表达均明显增加(P＜0.05),且HepG2细胞组明显高于HL-7701细胞组(P＜0.05).加入APN孵育细胞后,2种细胞AOX1基因及蛋白表达均明显低于未经APN孵育的对照组(P＜0.05)；并且随APN浓度升高,降幅增加.当APN浓度达到1.5 μg/mL时,细胞AOX1表达的降低不再随APN浓度的增加而发生明显变化.在APN浓度相同的条件下,HepG2细胞组中AOX1基因及蛋白表达降低的幅度明显高于HL-7701细胞组.结论 APN能有效降低脂防化肝脏细胞AOX1基因及蛋白表达,能很好的保护肝脏细胞,避免肝脏细胞发生NAFLD.
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脂联素对体外培养肝细胞乙醛氧化酶1分泌的影响
目的 探讨脂联素(Apm)对体外培养人肝脏细胞乙醛氧化酶1(AOX1)分泌的影响.方法 采用基因芯片、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析AOX1 mRNA的表达,用免疫印迹试验分析Apm、5-氨基咪唑-4-氨基甲酰胺(AICAR)、二甲双胍、非诺贝特酸(FBA)、棕榈酸及瘦素对体外培养细胞分泌AOX1的影响及AOX1在大鼠脂肪肝中的表达情况.结果 Apm、FBA能降低人肝细胞中AOX1 mBNA及其蛋白质的水平,而二甲双胍、AICAR、棕榈酸及瘦素对AOX1的表达没有明显影响.FBA能降低AOX1活性达35%,而二甲双胍对其活性基本没有影响.大鼠脂肪肝肝细胞中Apm分泌明显减少,AOX1的表达明显增多.结论 AOX1与肝脏脂肪化有关,Apm能抑制体外培养的人肝脏细胞分泌AOX1.
