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外侧引物文献资料
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丙型肝炎病毒1b型NS3基因扩增方案的改进
目的 优化扩增武汉地区HCV 1b型患者HCV非结构蛋白3(NS3)的cDNA,并进行测序.方法 从患者血清中提取HCV RNA,采用型特异性引物扩增分型法检测HCV患者基因分型.设计3对外侧引物和3对内侧引物,采用套式PCR技术(方案一)分别扩增HCV1b型患者的HCV NS3 3个区段,然后用3对内侧引物进行测序.为了优化NS3扩增和测序效果和减少操作繁琐,对引物进行改进,设计1对外侧引物和1对内侧引物,采用改进的套式PCR技术(方案二)直接扩增HCV 1b型患者的HCV NS3区,然后用3个正向引物和1个逆向引物进行测序.结果 改进的套式PCR技术(方案二)与套式PCR技术(方案一)相比,操作较为简单,而且扩增效率增高,扩增效果较好.结论 采用改进的套式PCR技术(方案二)扩增和测序HCV NS3区更迅速、有效、实用.
