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非结构蛋白5文献资料
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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定
目的制备丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5(NS5)的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗-Id scFv),为研制HCV NS5的抗-Id scFv疫苗奠定基础.方法采用噬菌体表面展示技术,将HCV NS5单克隆抗体固相包被于Nunc板,从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,随机挑选80个克隆,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验,对其进行免疫学检测,获得与HCV NS5单克隆抗体结合活性较强的抗-Id scFv阳性克隆,并对HCV NS5特异性抗-Id scFv的编码序列进行序列测定分析.结果筛选得到的HCV NS5抗-Id scFv片段由786bp组成,具有结合HCV NS5单克隆抗体的生物学活性和特异性.结论用噬菌体抗体库技术能够成功地获得HCV NS5的抗-Id scFv.本实验结果为开展用抗-Id scFv防治丙型肝炎的研究创造了条件.
