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细小病毒H1文献资料
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细小病毒H-1非结构蛋白NS1基因对人胃癌细胞的抑制作用研究
背景:前期研究表明细小病毒H-1(H-1 PV)对胃癌细胞生长具有一定抑制作用,非结构蛋白NSI可能是其细胞毒作用的效应蛋白.胃癌细胞CD44+群体中可能含有肿瘤干细胞.目的:探讨H-I PV非结构蛋白NS1基因对不同分化程度的人胃癌细胞的影响.方法:以双酶切和质粒测序鉴定真核表达质粒pcDNA3.1-NSl.采用脂质体法将重组质粒转染高分化胃癌MKN28细胞、中分化胃癌SCC7901 细胞和低分化胃癌 MKN45细胞,并设置空质粒转染对照.G418筛选稳定转染的细胞克隆,以RT-PCR法检测NS1基因表达,裸鼠体内成瘤实验检测NSI基因对不同分化程度胃癌细胞的作用,流式细胞术分析CD44表达.结果:重组质粒pcDNA3.1-NSl转染的三种胃癌细胞均稳定表达NS1 基因.以10<'6>300μ1浓度的肿瘤细胞皮下接种裸鼠3周后,MKN28细胞空质粒转染组和重组质粒pcDNA3.1-NSI转染组均观察到肿瘤生长:SGC7901、MKN45 细胞空质粒转染组形成瘤体,而重组质粒pcDNA3.1-NSI转染组未见瘤体.转染重组质粒pcDNA3.1-NSl后,MKN28细胞不表达CD44,SCC7901和MKN45细胞CD44表达明显降低.结论:H-l PV非结构蛋白NSI 基因表达对中低分化的胃癌细胞有较好的抗肿瘤活性,可能与其降低胃癌干细胞表型CD44的表达有关.
