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细胞分裂周期蛋白37文献资料
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猪带绦虫CDC37基因的克隆、表达与组织定位研究
目的 原核表达猪带绦虫(Taenia solium)细胞分裂周期蛋白37(cell division cycle 37,TsCDC37),并对其进行组织定位和免疫原性研究.方法 通过Blastx分析从猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中筛选出 TsCDC37基因,PCR扩增CDC37基因,以pET-28a(+)为载体构建目的基因原核表达体系,在大肠埃希菌(E.coli)BL-21/DE3 中诱导表达,纯化的重组蛋白免疫SD大鼠制备免疫血清,Western blotting分析重组蛋白的免疫原性,免疫组织化学方法观察TsCDC37在猪带绦虫成虫中的组织定位. 结果 PCR、双酶切和DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a-TsCDC37构建成功.目的基因在BL-21/DE3菌株中得到稳定表达,重组蛋白的相对分子质量(Mr)为52 000.纯化的重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清和猪带绦虫病、亚洲带绦虫病或牛带绦虫病患者血清识别.免疫组化结果显示,TsCDC37分布于猪带绦虫成虫表膜和子宫中的虫卵.结论 纯化后的猪带绦虫细胞周期分裂蛋白TsCDC37具有较强的免疫原性,主要定位于猪带绦虫成虫的表膜和子宫中的虫卵.
关键词： 猪带绦虫 细胞分裂周期蛋白37 抗原性 组织定位
