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富组氨酸蛋白-2(HRP-Ⅱ)文献资料
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恶性疟原虫富组氨酸蛋白-2基因诱导的免疫应答研究
[目的]探讨编码恶性疟原虫富组氨酸蛋白-2(HRP-Ⅱ)C端基因的真核表达重组质粒诱导小鼠的体液和细胞免疫效果.[方法]将起始码和终止码引入HRP-ⅡC端基因片段两端,经测序鉴定读框,将包含起始码和终止码的HRP-Ⅱ基因片段克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(-)中,进行酶切鉴定.用重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)/HRP-Ⅱ经肌肉免疫小鼠3次,每次间隔3wk.第3次免疫后2 wk,取小鼠血清和脾细胞,分别用ELISA测定HRP-Ⅱ抗体水平和用脾细胞增殖实验测定细胞免疫反应.[结果]序列测定结果表明,HRP-ⅡC端基因片段被准确地引入起始码和终止码;酶切鉴定表明包含起始码和终止码的HRP-ⅡC端基因片段成功地克隆入pcDNA3.1(-),形成pcDNA3.1(-)/HRP-Ⅱ.在pcDNA3.1(-)/HRP-Ⅱ免疫鼠血清中可检测出高水平的HRP-Ⅱ抗体,用原核表达的HRP-Ⅱ蛋白刺激免疫脾细胞,可检测出明显的细胞增殖反应.[结论]编码HRP-Ⅱ的真核表达重组质粒可诱导小鼠产生明显的体液和细胞免疫反应.其有可能作为恶性疟原虫红内期复合DNA疫苗的候选基因.
关键词： 恶性疟原虫 富组氨酸蛋白-2(HRP-Ⅱ) DNA疫苗 免疫反应
