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附睾蛋白酶抑制蛋白文献资料
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人Eppin基因的原核表达及抗原性鉴定
目的 构建人附睾蛋白酶抑制蛋白(epididymal protease inhibitor,eppin)基因原核表达质粒,表达并纯化重组蛋白,并探讨其抗原性及应用价值.方法 以健康人睾丸组织cDNA为模板进行PCR扩增,将其克隆到原核表达载体pET-32a,并转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,并对纯化产物进行Western印迹鉴定.结果 重组质粒经双酶切分析和测序鉴定后证实构建成功;SDS-PAGE结果显示表达产物为相对分子质量36KD的融合蛋白,Western印迹检测纯化后蛋白显示特异性条带.结论 成功构建了pET-32a-Eppin重组质粒,并获得了具有抗原特异性的可溶性Eppin蛋白,为进一步研究其生物学活性及免疫性避孕效应奠定了基础.
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附睾蛋白酶抑制蛋白的研究进展
附睾蛋白酶抑制蛋白(Eppin)基因是近克隆到的一种人类和小鼠附睾和睾丸中特异性表达的基因.Eppin蛋白是一种富含半胱氨酸同时含有乳清酸蛋白(WAP)和牛胰蛋白酶抑制蛋白(BPTI)结构域的分泌蛋白,它与精子成熟和生殖有关,此外还参与了人类附睾的天然免疫系统.针对Eppin蛋白的免疫避孕是一种有效和安全的方式,但还需进一步验证它的安全性.本文就Eppin的生殖和免疫功能及在免疫避孕中的应用进行综述.
