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转录辅助调节因子HCFC1突变致罕见X连锁甲基丙二酸尿症CblX型一家系报告
目的：探讨X连锁甲基丙二酸尿症CblX家系的临床及基因特点。方法回顾性分析1例经血液及尿液分析发现甲基丙二酸尿症，并采用靶向捕获二代测序进行HCFC1基因分析诊断的X连锁甲基丙二酸尿症患儿的临床资料。结果患儿，男，于2月龄时出现抽搐，智力运动障碍，5月龄时表现癫痫、重度发育落后，尿甲基丙二酸、血液丙酰肉碱增高，血浆总同型半胱氨酸增高，符合甲基丙二酸尿症合并同型半胱氨酸血症。甲基丙二酸尿症相关常染色体基因分析未见突变，X染色体转录辅助调节因子HCFC1第3外显子存在c.344C?>?T（p.Ala115Val）半合子突变，证实为CblX型甲基丙二酸尿症。患儿父母健康，曾有一子生后重度智力、运动障碍，合并难治性癫痫，于6月龄夭折。患儿母亲携带相同的突变，尿液可检出少量甲基丙二酸，血浆同型半胱氨酸轻度增高。患儿父亲未携带突变。结论以新一代测序技术首次确诊我国1例X连锁CblX型甲基丙二酸尿症家系。
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多重置换扩增(MDA)结合荧光PCR对植入前胚胎进行性别诊断的研究
目的:建立多重置换扩增(MDA)联合荧光PCR对植入前胚胎进行性别诊断的方法,为开展性连锁遗传病的性别筛选提供实验依据.方法:在行IVF-ET助孕的患者中,选取废弃的第3日新鲜或冷冻后的2PN受精胚胎.通过显微操作活检得到单个卵裂球细胞,采用MDA方法对单个/2个卵裂球细胞行全基因组扩增,然后采用荧光PCR方法对AMEL、X22、SRY和XHPRT4个性染色体相关基因或STR位点进行扩增,对其扩增产物行毛细管电泳检测,分析电泳结果确定植入前胚胎的性别.以父母的外周血单个淋巴细胞作为对照进行分析.结果:①采用蛋白酶K法(n=21)和碱法(n=17)对卵裂球细胞进行裂解行MDA,扩增成功率未见统计学差异(85.7％ vs 82.4％,P＞0.05)；单个卵裂球组(n=15)和2个卵裂球组(n=23)MDA扩增成功率亦未见统计学差异(80.0％ vs87.0％,P＞0.05).②利用MDA方法对15个胚胎的单个/2个卵裂球进行扩增,扩增成功率为86.7％(n=13). 13个胚胎中7个为男性,6个为女性,性别检测成功率100％；等位基因脱扣(alleledropout,ADO)发生率为7.7％.结论:PGD中MDA是有效且可靠的全基因组扩增方法,MDA结合荧光PCR可以用于性连锁遗传病的性别筛选、致病基因检测和对胚胎进行HLA分型.
