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人乳腺癌细胞凋亡与去磷酸化Rb蛋白和PCNA的关系
目的:研究乳腺癌细胞凋亡与去磷酸化Rb蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)的关系.方法:应用MTT比色法检测多柔比星(又名阿霉素,ADR)对体外培养的MCF-7/S细胞增殖抑制作用,应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡,采用免疫组织化学法检测ADR作用前后去磷酸化Rb蛋白和PCNA的表达.结果:ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性;ADR作用组MCF-7/S细胞的凋亡率及去磷酸化Rb蛋白的表达量与对照组相比明显增高(P＜0.01);PCNA阳性表达率与对照组相比明显降低(P＜0.01).结论:ADR作用组,MCF-7/S细胞的凋亡率(AR)与去磷酸化Rb蛋白的表达量呈正相关,与增殖细胞核抗原的阳性表达率呈负相关.
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人乳腺癌细胞凋亡与去磷酸化RB蛋白的关系
目的:研究乳腺癌细胞凋亡与去磷酸化RB蛋白的关系.方法:以乳腺癌细胞株MCF-7/S(化疗敏感细胞株)和MCF-7/ADR(耐多柔比星细胞株)为研究对象,用MTT比色法检测乳腺癌细胞的化疗敏感性;采用免疫细胞化学法检测多柔比星(ADR)作用前后RB蛋白的表达状态;应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡程度.结果:ADR能抑制敏感细胞MCF-7/S增殖,半数抑制浓度(IC50)为0.128 μg/ml,而对应的耐药细胞MCF-7/ADR IC50值为10.89 μg/ml, MCF-7/S细胞较MCF-7/ADR细胞对ADR敏感 86 倍.加ADR前两种细胞胞核中的磷酸化RB蛋白均为阳性,去磷酸化RB蛋白均为阴性.经不同浓度ADR处理后,随着ADR浓度的增加,MCF-7/S细胞去磷酸化RB蛋白表达量逐渐增高,而MCF-7/ADR细胞去磷酸化RB蛋白表达量无明显增高.流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,结果表明ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡作用比MCF-7/ADR强(P<0.01).结论:乳腺癌MCF-7/S细胞凋亡与去磷酸化RB蛋白表达呈正相关(P<0.05),而MCF-7/ADR细胞凋亡与去磷酸化RB无明显相关(P>0.05).
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去磷酸化RB蛋白在乳腺癌细胞凋亡中的作用
目的:研究去磷酸化RB蛋白表达在人乳腺癌细胞凋亡中的作用. 方法:以乳腺癌细胞株MCF-7/S(化疗敏感细胞株)和MCF-7/Adr(耐多柔比星细胞株)为研究对象,采用免疫细胞化学法检测多柔比星(ADR)作用前、后RB蛋白的表达状态;应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡程度. 结果:加ADR前两种细胞胞核中的磷酸化RB蛋白均为阳性,去磷酸化RB蛋白均为阴性.经不同浓度ADR处理后,随着其浓度的增加,MCF-7/S细胞去磷酸化RB蛋白表达量逐渐增高,而MCF-7/Adr细胞去磷酸化RB蛋白表达量无明显增高.流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,结果表明ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡作用比MCF-7/Adr强(P<0.01). 结论:去磷酸化RB蛋白表达与MCF-7/S细胞凋亡呈正相关,而与MCF-7/Adr细胞凋亡无明显相关性.
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阿霉素对人乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响
[目的]检测阿霉素(ADR)对体外人乳腺癌化疗敏感细胞(MCF-7/S)凋亡和增殖的影响,并探讨其可能的作用机理.[方法]应用MTT比色法检测ADR对体外培养的MCF-7/S细胞增殖抑制作用,应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡,采用免疫细胞化学法检测ADR作用前后去磷酸化Rb蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.[结果]ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性;ADR组MCF-7/S细胞的凋亡率、磷酸化Rb蛋白的表达量与对照组相比明显增高(P＜0.01);PCNA阳性表达率与对照组的相比明显降低(P＜0.01).在ADR组,MCF-7/S细胞的凋亡率(AR)与去磷酸化Rb蛋白的表达量呈正相关,与增殖细胞核抗原的阳性表达率呈负相关.[结论]ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡并抑制MCF-7/S细胞增殖可能与其上调去磷酸化Rb蛋白和下调细胞内增殖细胞核抗原表达水平有关.
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阿霉素对人乳腺癌细胞凋亡及去磷酸化RB蛋白表达的影响
目的:探讨阿霉素(ADR)体外诱导人乳腺癌化疗敏感细胞(MCF-7/S)凋亡与去磷酸化RB蛋白表达之间的关系.方法:应用MTT比色法检测ADR对体外培养的MCF-7/S细胞增殖抑制作用,同时应用末端标记(TUNEL)法观测ADR对MCF-7/S细胞凋亡程度的影响.采用免疫细胞化学法检测去磷酸化RB蛋白的表达水平.结果:ADR抑制MCF-7/S细胞增殖呈剂量依赖性, 半数抑制浓度(IC50)为 0.128 mg·L-1;ADR作用组MCF-7/S细胞的凋亡率 (apoptotic rate, AR)为 0.261,较对照组(0.045)明显增高(P＜0.01); ADR作用组MCF-7/S细胞的去磷酸化RB蛋白表达量MOD(阳性细胞平均光密度)×area(阳性面积相对比)均数是987±207,较对照组132±32显著增高(P＜0.01); ADR能促进MCF-7/S细胞内去磷酸化RB蛋白的表达.在ADR作用组,MCF-7/S细胞的凋亡率与去磷酸化RB蛋白表达量呈正相关(P<0.05).结论:ADR抑制MCF-7/S细胞增殖和诱导MCF-7/S细胞凋亡可能与细胞内去磷酸化RB蛋白表达水平有关.
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去磷酸化RB蛋白表达与人乳腺癌细胞凋亡及药物敏感性的关系
随着肿瘤分子生物学研究的发展,人们已逐步认识到肿瘤的基因表达不但决定肿瘤的发生、发展和预后,而且对肿瘤的化疗药物敏感性也有影响,这些研究结果为探讨化疗药物敏感性的预测奠定了基础[1].RB蛋白通过影响肿瘤的细胞周期而对化疗药物敏感性产生影响.本实验以人乳腺癌细胞为研究对象,探讨去磷酸化RB蛋白与乳腺癌细胞凋亡和对化疗药物敏感性的关系.
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去磷酸化RB蛋白表达对阿霉素诱导MCF-7/S细胞凋亡的影响
目的检测经阿霉素(ADR)处理的人乳腺癌MCF-7/S细胞的凋亡率(AR)及去磷酸化RB蛋白表达的变化,以探讨ADR诱导细胞凋亡的可能机理.方法将体外培养的MCF-7/S细胞分为实验组(以不同浓度ADR处理细胞)及对照组(以等体积的生理盐水处理细胞);应用MTT比色法检测ADR对MCF-7/S细胞的抑制率(IR);应用流式细胞术检测实验组和对照组细胞的AR;采用S-P免疫组化染色法检测ADR作用后去磷酸化RB蛋白表达的变化.结果ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性,IC50为0.128 mg/L;0.25、2、5 μg/ml ADR处理的MCF-7/S细胞的AR分别为0.171、0.184、0.259,而对照组MCF-7/S细胞的AR为0.045,两者比较,有非常显著性差异(P＜0.01);5 μg/ml ADR实验组MCF-7/S细胞的去磷酸化RB蛋白的表达量为986.8±207.4,而对照组为131.7±31.9,两者比较,有非常显著性差异(P＜0.01);5 μg/ml ADR实验组MCF-7/S细胞的AR与其去磷酸化RB蛋白的表达量呈正相关(γ=0.998,P=0.037).结论ADR能抑制MCF-7/S细胞增殖并诱导其凋亡,其机理可能与去磷酸化RB蛋白表达水平上调有关.
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去磷酸化RB蛋白表达状况对阿霉素诱导人乳腺癌细胞凋亡和抑制其增殖的关系
目的探讨去磷酸化RB蛋白表达状况对阿霉素(ADR)诱导人乳腺癌细胞(MCF-7/S)凋亡和抑制其增殖的影响.方法应用MTT比色法检测ADR对MCF-7/S细胞增殖抑制作用,同时应用末端标记(TUNEL)法测定ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡程度.采用免疫细胞化学法检测去磷酸化RB蛋白的表达状况.结果 ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为0.128mg*L-1;ADR作用组MCF-7/S细胞的凋亡率及去磷酸化RB蛋白的表达量分别与对照组细胞相比明显增高.结论去磷酸化RB蛋白的表达量与ADR抑制MCF-7/S细胞增殖和诱导MCF-7/S细胞凋亡呈正相关.
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雄激素缺乏对雄性小鼠主动脉增龄性变化的影响
目的 探讨雄激素缺乏对C57BL/6J雄鼠主动脉血管壁组织增龄性变化的影响.方法 24只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为正常组(n=8)和去势组(n=8),另外8只C57BL/6J小鼠作为自然衰老组饲养18个月,测定各组血清睾酮浓度.并分离小鼠主动脉测定丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的浓度,Western-blot测定去磷酸化Rb蛋白表达量以及提取主动脉线粒体DNA,用巢氏PCR技术分析线粒体DNA缺失突变率.结果 与正常组相比,去势组血清睾酮浓度明显下降[(1.05±0.53)ng/ml vs(8.67±0.97)ng/ml,P<0.01];MDA浓度升高[(1.55±0.43)nmol/mgprot vs(2.42～0.41)nmol/mgprot,P<0.01];SOD浓度降低[(27.92±2.28)U/nd vs (17.09±1.71)U/ml,P
