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γc家族细胞因子对体外培养T细胞表型的影响
目的:探讨γc家族细胞因子对体外培养T细胞表型的影响,为过继免疫治疗体外细胞制备提供实验依据.方法:采用健康人外周静脉血单个核细胞(PBMC),应用尼龙毛柱法、CD3磁珠阳性分选法、CD3磁珠阴性分选法和自然沉降法等4种方法分选T细胞,比较各种方法获取的T细胞纯度、回收率和细胞增殖.用CD3/CD28免疫磁珠激活CD3+T细胞,γc家族细胞因子分为IL-2组和IL-7、IL-15、IL-21混合组,比较两组T细胞扩增倍数和表型的差异.结果:CD3磁珠阴性分选的T细胞纯度显著高于尼龙毛柱分选、CD3磁珠阳性分选、自然沉降分选[(94.06±1.07)％vs (86.74±1.06)％、(89.61±1.40)％、(88.48±1.86)％,P＜0.05],自然沉降分选的T细胞回收率显著高于其余3种分选法[(60.29±1.53)％ vs (45.03±2.79)％、(20.15±3.41)％、(42.98±2.82)％,P＜0.05),综合比较效果以自然沉降法为优选择.IL-2组T细胞扩增倍数显著高于混合组[(262.6±143.2)vs(73.0±25.8)倍,P＜0.05].混合组的早期记忆T细胞占总T细胞的比例、Tscm和Tscm-like、Tcm所占比例均显著高于IL-2组[(55.6±±.82)％ vs (39.6±±.52)％,(16.6±±.82)％ vs(9.8±1.30)％,(39.0±1.58)％ vs (29.2±1.79)％;均P＜0.05].结论:自然沉降法从PBMC中分选T细胞具有低成本、高纯度、高回收率的优势.IL-7、IL-15和IL-21混合培养有利于早期记忆T细胞的生成,为肿瘤过继免疫治疗的体外细胞制备提供了实验依据.
