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溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53对肝癌细胞的体外杀伤作用
目的:研究携带细胞穿膜肽11R和P53的溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53对肝癌细胞的体外杀伤作用.方法:以本课题组前期实验构建的携细胞穿膜肽11R和P53的溶瘤腺病毒SG7605-11R-P53和不携11R的溶瘤腺病毒SG7605-P53感染肝癌细胞HepG2、SMMC-7721、Hep3B、Huh7和正常成纤维细胞株BJ,Western blotting检测感染后细胞P53和11R-P53的表达情况,TCID50法检测SG7605-11R-P53和SG7605-P53在肝癌细胞中的增殖能力,MTT法检测SG7605-11 R-P53对肝癌细胞及正常细胞的杀伤作用.结果:SG7605-11R-P53和SG7605-P53能在肝癌细胞中高表达P53和11 R-P53蛋白.SG7605-11R-P53可在HepG2、SMMC-7721、Hep3B和Huh7细胞中大量增殖,其增殖倍数是SG7605-P53的10 ～100倍,但在正常BJ细胞内几乎不增殖.SG7605-11R-P53在MOI=0.1时对Hep3B细胞的杀伤率达90％,对于正常BJ细胞只有当MOI=50时才有很弱的抑制作用；SG7605-11R-P53对4种肝癌细胞杀伤作用的大小依次为Hep3B、HepG2、Huh7和SMMC-7721细胞.结论:携带细胞穿膜肽11R和P53的SG7605-11R-P53溶瘤腺病毒体外对4种肝癌细胞株均有较好的靶向杀伤作用,尤其对Hep3B细胞的杀伤作用强.
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一个革命性的抗癌研究策略:癌症的靶向基因-病毒治疗
2001年,笔者提出了癌症的靶向基因-病毒治疗(cancer targeting gene-viro-therapy,CTGVT)的概念,即将一个抗癌基因插入到溶瘤病毒(oncolytic virus,Ov)中,从而将基因治疗与溶瘤病毒各自的优势结合起来,由于溶瘤病毒能大量复制,插入其中的基因也能大量复制,故其抗肿瘤效果大增,较单用基因治疗或OV治疗强数十至上百倍.随后又引入双基因策略(CTGVT-DG),即向OV载体插入两个抗癌基因,由于两个抗癌基因之间可能存在互补或协同效应,在一些动物癌症模型中几乎能杀灭全部移植性肿瘤.近年来又采用纳米粒子把CTGVT-DG病毒颗粒包被,或者采用溶瘤痘病毒(OncoPox)作为载体与CTGVT-DG策略相结合,后者将可构建一系列抗癌作用极好的双基因OncoPox-gene1-gene2产物.国外多数使用OV-GM-CSF策略,仅局限于GM-CSF的免疫功能,忽视了基因复制的剂量效应及其重要性,这就是中国的CTGVT-DG胜过西方的优势之处.
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溶瘤腺病毒靶向治疗恶性肿瘤研究进展
恶性肿瘤是当今世界严重威胁人类健康的疾病，也是人类生命的主要“杀手”之一。传统的放、化疗及手术治疗存在抗肿瘤能力低、杀伤指数过小、副作用大极易复发等缺点，对很多中晚期肿瘤患者往往缺少合适的治疗手段，因此，开发安全高效的生物治疗方法已成为肿瘤治疗领域关注的热点。基因-病毒治疗即是其中之一，它是将基因通过载体转入患者体内，从而达到治疗和预防肿瘤的目的。溶瘤腺病毒作为基因治疗的一种常用载体，在肿瘤治疗方面有着自生的优点和长处。本文简单对这一领域的研究进展进行综述。
