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miR-138-5p通过靶向TCF3实现对胃癌细胞SGC-7901侵袭和迁移的调控
目的:探讨miR-138-5p与T细胞因子3基因(T cell factor 3,TCF3)的靶向关系及其对人胃癌细胞SGC-790l侵袭和迁移能力的影响.方法:miR-138-5p模拟物转染SGC-7901细胞后,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-138-5p和TCF3 mRNA的相对表达;生物信息学方法预测miR-138-5p与TCF3基因的靶向匹配关系,采用荧光素酶报告基因系统鉴定该关系.miR-138-5p转染正常胃癌细胞和TCF3高表达胃癌细胞后,Western blotting检测TCF3、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Slug)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,Transwell小室检测胃癌细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力.结果:miR-138-5p过表达抑制TCF3mRNA的表达;生物信息学软件预测显示miR-138-5p与TCF3 mRNA有靶向结合区域,miR-138-5pmimic降低TCF3野生型质粒的荧光素酶活性,不影响TCF3突变型质粒的荧光素酶活性.miR-138-5p抑制TCF3蛋白表达,miR-138-5p减弱TCF3过表达对SGC-7901细胞侵袭和迁移能力的促进作用,同时其下调N-cadherin、Vimentin和Slug蛋白表达、上调E-cadherin蛋白表达.结论:miR-138-5p抑制胃癌细胞SGC-7901的侵袭和迁移,与直接靶向调控TCF3的表达有关.
关键词: 胃癌 SGC-7901细胞 miR-138-5p T细胞因子3基因 侵袭 迁移