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改良CAM移植瘤模型的制备及其对肿瘤血管新生抑制药物的筛选效果
目的:以改良方法在鸡胚绒膜尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)上接种人成神经胶质瘤U87细胞制备移植瘤,验证改良模型筛选抗肿瘤血管新生药物的有效性和可行性.方法:将鸡胚种蛋随机分为2组,分别使用传统方法与改良方法建立CAM-U87移植瘤模型;改良方法在鸡胚孵育中增加9～16h的开窗适应期,再将特制的硅胶圈放置在CAM组织一级血管的半侧;硅胶圈内接种U87细胞建立CAM-U87移植瘤模型.模型的硅胶圈内分别加入经典抗血管新生药物沙利度胺(50、100、200 μg/ml)和自主研发抗血管新药G3B6,以DMSO为对照;体视显微镜观察肿瘤形态,H-E染色法观察瘤组织新生微血管密度(microvessel density,MVD),原位杂交(in situ hybridization,ISH)技术检测血管标记物VEGFR2的表达.结果:成功制备改良CAM-U87细胞移植瘤,改良模型不影响CAM本身的血管生成,其瘤细胞接种成功率较传统模型显著升高[(70.00 ±4.226)％ vs (41.25 ±5.154)％;t=4.314,P=0.000 7],移植瘤体积显著增大[(60.20 ±6.012)vs (15.97 ±2.403)mm3;t=6.012,P＜0.000 1].沙利度胺和G3B6两药均能显著抑制移植瘤组织中的血管形成,使瘤组织中MVD显著降低[沙利度胺200 μg/ml时(15.85±1.15)％vs(29.80±4.16)％;t=2.49,P=0.047 4]、VEGFR2表达明显减少.结论:改良方法成功制备CAM-U87移植瘤模型,经沙利度胺和G3B6验证,该模型对抗肿瘤血管新生药物的筛选具有良好的有效性和可行性.
