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食管鳞癌中RASSF5基因不同转录本的表达及其甲基化状态
目的:探讨Ras相关区域家族5(Ras-association domain family 5,RASSF5)基因不同转录本在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及其甲基化状态.方法:应用RT-PCR法检测49例食管鳞癌组织及其癌旁正常组织中RASSF5基因不同转录本mRNA的表达及DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycitydine,5-aza-dC)处理前后食管癌细胞TE1、TE13、T.Tn和Ec109中RASSF5A mRNA的表达;应用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)法检测49例食管鳞癌组织及其癌旁正常组织和5-aza-dC处理前后食管癌细胞中RASSF5A甲基化状态,应用免疫组织化学法检测49例食管鳞癌组织及其癌旁正常组织中RASSF5A蛋白的表达.结果:RASSF5A转录本是在食管鳞状上皮中表达的主要转录本.经5-aza-dC处理后,TE1、TE13、T.Tn和Ec109细胞中RASSF5A mRNA的表达水平均上调(P＜0.05); TE1细胞中RASSF5A基因甲基化程度降低,非甲基化程度增加,TE13、T.Tn和Ec109细胞中RASSF5A基因均表现为非甲基化状态.食管鳞癌组织中RASSF5A mRNA的表达水平明显低于癌旁正常组织(P＜0.01),其蛋白的阳性表达率(26.5％,13/49)也显著低于癌旁正常组织(75.5％,37/49) (P＜0.01).食管鳞癌组织中RASSF5A基因启动子区的甲基化率(55.1％,27/49)显著高于癌旁正常组织(28.6％,14/49) (P＜0.05),并与淋巴结转移和肿瘤组织的分化程度有关(P＜0.01).结论:食管鳞状上皮组织中RASSF5的主要转录本可能是RASSF5A,RASSF5A基因启动子区异常高甲基化导致的基因沉默可能与食管鳞癌的发生、转移及恶性进程有关.
