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  • 介孔硅纳米微粒共转运阿霉素和shRNA对耐药口腔鳞癌细胞株的作用

    作者:王丹丹;唐琪;布文奂;张雪;徐晓薇;张恺;孙宏晨

    目的:考察介孔二氧化硅纳米微粒(mesoporous silica nanoparticle,MSNP)共转运体系逆转肿瘤多药耐药、杀伤肿瘤细胞的效果,证实阿霉素(doxorubicin,DOX)与MDR1shRNA共同应用具有协同抗肿瘤作用。方法:首先采用溶胶-凝胶法制备MSNP,通过表面修饰阳离子聚合物聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)使其带有正电荷,能够与带负电的MDR1shRNA相结合,同时将抗肿瘤药物DOX吸附于介孔内部,形成载药、载基因的共转运体系。体外采用紫外可见光分光光度法测定载药量;通过MTT法测定DOX对口腔鳞癌细胞株KB及耐药株KBV的半抑制浓度IC50;使用荧光显微镜、流式细胞仪测定转染效率;应用Real-Time PCR技术检测MDR1基因的表达水平;AnnexinV-FITC/7-AAD双染法经流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:纳米粒度仪、透射电镜测得所合成的MSNP尺寸为100~200 nm,表面介孔直径约3~5 nm,分散性较好,尺寸较均一;紫外分光光度计法测得IC50(KB-DOX)=182.9 ng/mL、IC50(KBV-DOX)=9233.5 ng/mL,计算耐药株KBV的耐药倍数为50.483871倍;荧光显微镜、流式细胞仪测得转染效率为6.73%;Real-Time PCR结果显示:与单纯载药、载基因组相比,双载组MDR1基因的表达水平显著下调;Annex-inV-FITC/7-AAD双染法经流式细胞仪测得单纯载药、单纯载基因组细胞凋亡率分别为12.74%、10.08%,而双载组细胞凋亡率增加到25.68%。结论:介孔二氧化硅纳米微粒共转运体系能够有效逆转肿瘤多药耐药,与单纯载药、载基因组相比,同时应用DOX与MDR1shRNA具有协同抗肿瘤作用。

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